目的:建立鼠痘病毒的荧光定量Taqman-PCR检测方法,以期能快速、准确、灵敏、特异的检出鼠痘病毒。方法经过比对和筛选,本研究选取鼠痘病毒的ERPV_027基因480-800位序列段,作为引物设计位点设计引物和探针,并对该引物对和探针的特异性、灵敏性、稳定性和重复性进行检测。结果本研究建立的方法,对鼠痘病毒的检测极限是68 copies/μL;该方法特异性强,只对鼠痘病毒特定片段进行特异性扩增,而对小鼠肝炎病毒、仙台病毒、沙门氏菌等其它病毒、细菌无扩增;该方法稳定性和重复性均较好。结论本研究成功建立了检测鼠痘病毒的荧光定量Taqman-PCR方法,该方法特异性强、灵敏度高,且具有较好的稳定性和重复性,具有广阔的应用价值。
作者:杜江涛;戴方伟;周莎桑;宋晓明;吕宇;萨晓婴
来源:中国比较医学杂志 2015 年 6期