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 聚合酶链反应(PCR)扩增HBV X基因,克隆至真核表达载体Pvr1012中,构建HBV X基因重组表达载体Pvr1012-X;以该质粒转染HepG2细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞X蛋白的瞬时表达;与报告质粒Psv-lacZ共转染HepG2细胞,用试剂盒法检测β-半乳糖苷酶表达活性。结果质粒Pvr1012-X在HepG2细胞瞬时表达X蛋白,共转染实验中Pvr1012-X组β-半乳糖苷酶的表达是空质粒对照的3.2倍。表明构建的表达载体能在哺乳动物细胞中表达,并能够反式激活SV40病毒早期启动子。

作者:刘妍;董菁;成军;钟彦伟;夏小兵;李克;王琳;施双双;段惠娟

来源:解放军医学杂志 2001 年 26卷 6期

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作者:
刘妍;董菁;成军;钟彦伟;夏小兵;李克;王琳;施双双;段惠娟
来源:
解放军医学杂志 2001 年 26卷 6期
标签:
乙肝病毒X基因 真核表达 反式激活 SV40早期启动子
 聚合酶链反应(PCR)扩增HBV X基因,克隆至真核表达载体Pvr1012中,构建HBV X基因重组表达载体Pvr1012-X;以该质粒转染HepG2细胞,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞X蛋白的瞬时表达;与报告质粒Psv-lacZ共转染HepG2细胞,用试剂盒法检测β-半乳糖苷酶表达活性。结果质粒Pvr1012-X在HepG2细胞瞬时表达X蛋白,共转染实验中Pvr1012-X组β-半乳糖苷酶的表达是空质粒对照的3.2倍。表明构建的表达载体能在哺乳动物细胞中表达,并能够反式激活SV40病毒早期启动子。