目的探讨晚期糖基化终产物(AGE)诱导单核细胞产生白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)的细胞内信号传导机制.方法采用密度梯度离心法分离健康成人外周血单核细胞,经AGE修饰的人血清白蛋白(AGE-HSA)刺激后,用 ELISA法检测培养上清中IL-1β、TNF-ɑ水平,用化学发光法测定活性氧的生成;免疫细胞化学染色及凝胶迁移电泳(EMSA)法观察核因子-κB(NF-κB/p65)的激活.分别用抗AGE受体(RAGE)抗体、NADPH氧化酶特异性抑制剂apocynin和p38通路抑制剂SB 203580预处理单核细胞,观察对AGE-HSA诱导细胞因子和活性氧产生的影响.结果 AGE-HSA与单核细胞在体外共同培养后,细胞内NF-κB激活,培养上清中IL-1β、TNF-ɑ水平明显增高,活性氧生成增加;用抗RAGE抗血清或apocynin预处理细胞可阻断AGE-HSA诱导的活性氧生成(P<0.01),抑制NF-κB的活化并使培养上清IL-1β、TNF-ɑ显著降低(P<0.01).用SB 203580预处理细胞也可抑制AGE-HSA诱导的NF-κB激活及IL-1β、TNF-ɑ的产生,但对活性氧的产生无明显影响 (P>0.05).结论 AGE通过RAGE介导的途径刺激单核细胞生成IL-1β、TNF-ɑ和活性氧,NADPH氧化酶途径可能是RAGE细胞内信号途径的上游,而AGE诱导的细胞因子生成依赖于p38磷酸化.
作者：刘阳；刘尚喜；侯凡凡
来源：解放军医学杂志 2004 年 29卷 11期
