目的 探讨RNA干扰阻滞胸腺素β1表达对TGF-β1诱导人肾小管上皮-肌成纤维细胞转分化(EMT)的抑制作用.方法 构建能表达针对胸腺素β1的小干扰RNA(siRNA)的重组腺病毒载体,以及表达不针对任何已知mRNA的siRNA的阴性对照载体,分别感染人肾小管上皮细胞株(HKC),得到胸腺素β1表达受抑制的HKC-siTβ4和胸腺素β4表达未受影响的HKC-siC.根据用TGF-β1处理HKC、HKC-siTβ4和HKC-siC的情况,将培养的细胞分为4组:正常HKC组(C组),TGF-β1处理HKC组(T+C组),TGF-β1处理HKC-siTβ1组(T+siTβ1组)和TGF-β1处理HKC-sic组(T+siC组).48h后,分别采用RT-PCR和Western blotting检测各组胸腺素β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素表达,并分析胸腺素β1和α-SMA表达量的相关性.结果 C组胸腺素β4表达弱阳性,α-SMA表达阴性,E-钙黏素表达强阳性;T+C组胸腺素β1和α-SMA表达强阳性,E_钙黏素表达较C组减弱(P<0.01);T+siTβ1组胸腺素β1和α-SMA表达弱阳性,表达量显著低于T+C组(P<0.01),E-钙黏素显著高于T+C组(P<0.01);T+siC组胸腺素β1、α-SMA和E-钙黏素表达与T+C组相比均无显著差异(P>0.05).胸腺素β4和α-SMA表达呈显著正相关.结论 RNAi阻滞胸腺素β4表达能有效地抑制TGF-β1诱导EMT,提示胸腺素β4是介导TGF-β1诱
作者:张璟;卓文磊;王彦;敖绪军;郑颖
来源:解放军医学杂志 2008 年 33卷 9期