目的 研究CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA两种融合肽在慢性粒细胞白血病(CML) K562细胞中的定位及其与BCR-ABL蛋白的相互作用.方法 将前期制备的CTP-OD 1-HA和CTP-OD2-HA融合肽转导入K562细胞,采用免疫荧光和Western blotting方法检测其入胞情况及胞内定位,His-pull down和CoIP实验检测融合肽与BCR-ABL的相互作用.结果 免疫荧光检测显示CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA融合肽均能穿过细胞膜进入细胞并定位于胞质,Western blotting也同时检测到进入细胞质中的两种融合肽.His-pull down实验结果表明,CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA融合肽在细胞外均可直接与BCR-ABL蛋白结合,CoIP实验结果显示两种融合肽在K562细胞内也能与BCR-ABL蛋白结合并形成复合物.结论 CTP-OD1-HA和CTP-OD2-HA融合肽均能成功进入白血病K562细胞并定位于细胞质,且可与BCR-ABL蛋白发生相互作用.
作者:肖恒;王海霞;陶崑;刘鑫;钟梁;黄世峰;冯文莉
来源:解放军医学杂志 2013 年 38卷 11期