目的 探讨缺氧环境下自噬对大鼠内皮祖细胞(EPCs)迁移、凋亡的影响.方法 采用密度梯度离心法分离获取EPCs并用荧光双染法鉴定大鼠骨髓源性EPCs.为检测缺氧对EPCs迁移、凋亡及自噬水平的影响,将细胞分为4组:常氧培养组(即缺氧0h组)、缺氧1h组、缺氧3h组和缺氧6h组,用Transwell小室和流式细胞术分别检测各组细胞迁移和凋亡情况,Western blotting检测EPCs自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ和p62的改变.为检测沉默自噬后缺氧对EPCs的影响,将细胞分为4组:缺氧0h组、缺氧3h组、缺氧3h+沉默Atg7(ShAtg7)组和ShAtg7组,再次观察EPCs迁移及凋亡的变化.结果 与缺氧0h组比较发现,缺氧3h及6h后EPCs迁移能力明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05);且缺氧3h及6h后EPCs内自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/Ⅰ的表达明显升高(P<0.05),p62表达明显降低(P<0.05).ShAtg7抑制自噬后发现,与缺氧3h组比较,缺氧3h+ShAtg7组的EPCs迁移能力进一步降低(P<0.05),细胞凋亡率进一步升高(P<0.05).结论 缺氧环境下自噬可促进EPCs迁移并减少凋亡,可对EPCs存活发挥保护作用.
作者:余森;杨杰;张继航;黄岚
来源:解放军医学杂志 2018 年 43卷 4期