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目的 探究大鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)在不同浓度葡萄糖条件下的增殖、迁移及血管形成情况,为后续高糖环境EPCs病理生理机制探究提供参考.方法 通过密度梯度离心法分离大鼠骨髓来源单个核细胞,经过培养纯化后得到原代EPCs.将EPCs分为5组,EGM-2培养基含有5 mM葡萄糖,将5 mM组设为对照组,添加葡萄糖使10 mM组、15 mM组、20 mM组、25 mM组达到相应的浓度.通过吞噬结合实验鉴定EPCs,CCK-8试剂盒检测不同时间点EPCs的增殖能力以及绘制生长曲线.Transwell实验检测EPCs迁移能力.观察EPCs体外血管形成情况.结果 首次更换培养基后,贴壁细胞为圆形,7 d呈纺锤形,14 d呈铺路石样.所培养细胞具有吞噬Dil-acLDL与FITC-UEA-I结合的特性,为EPCs,细胞阳性率为(93.10±0.85)

作者:李中轩;陈韵岱

来源:中国循证心血管医学杂志 2018 年 10卷 2期

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作者:
李中轩;陈韵岱
来源:
中国循证心血管医学杂志 2018 年 10卷 2期
标签:
内皮祖细胞 糖尿病 增殖 迁移 Endothelial progenitor cells Diabetes Proliferation Migration
目的 探究大鼠内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)在不同浓度葡萄糖条件下的增殖、迁移及血管形成情况,为后续高糖环境EPCs病理生理机制探究提供参考.方法 通过密度梯度离心法分离大鼠骨髓来源单个核细胞,经过培养纯化后得到原代EPCs.将EPCs分为5组,EGM-2培养基含有5 mM葡萄糖,将5 mM组设为对照组,添加葡萄糖使10 mM组、15 mM组、20 mM组、25 mM组达到相应的浓度.通过吞噬结合实验鉴定EPCs,CCK-8试剂盒检测不同时间点EPCs的增殖能力以及绘制生长曲线.Transwell实验检测EPCs迁移能力.观察EPCs体外血管形成情况.结果 首次更换培养基后,贴壁细胞为圆形,7 d呈纺锤形,14 d呈铺路石样.所培养细胞具有吞噬Dil-acLDL与FITC-UEA-I结合的特性,为EPCs,细胞阳性率为(93.10±0.85)