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目的 观察血管内皮生长因子-165(vascular endothelial growth factor-165,VEGF165)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的人外周血来源内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)增殖损伤及细胞周期相关蛋白表达的影响.方法 采用密度梯度离心法和贴壁培养法从人外周血中分离培养内皮祖细胞.在经MTT实验筛选出过氧化氢处理浓度后,对EPCs进行实验分组:正常对照组,不给予任何处理因素;VEGF165处理组,以终浓度为25ng/mL的VEGF165孵育24 h;过氧化氢处理,以终浓度200 μmol/L过氧化氢处理内皮祖细胞24 h;VEGF 165预处理组,经浓度为25 ng/mL的VEGF165预孵育30 min后,再与终浓度为200μmol/L的H2O2共孵育24 h.CCK-8法检测各组内皮祖细胞增殖活性的差异;Western blot分析各组内皮祖细胞中细胞周期相关蛋白cyclin D1和PCNA的蛋白表达情况.结果 与对照组相比,VEGF165处理组内皮祖细胞增殖活性增高(P<0.05);过氧化氢处理组内皮祖细胞增殖活性较对照组降低(P<0.05),且细胞周期相关蛋白cyclin Dl和PCNA下调(P<0.05); VEGF165预处理组中,EPCs增殖活性较过氧化氢处理组增高(P<0.05),且cyclin D1和PCNA蛋白表达上调(P<0.05).结论 VEGF165可促进人外周血来源的内皮祖细胞的增殖,对过氧化氢诱导的内皮祖细胞

作者:刘芳;桑甜甜;曹青;王飞;黄黎亚;郑兴

来源:老年医学与保健 2014 年 20卷 6期

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作者:
刘芳;桑甜甜;曹青;王飞;黄黎亚;郑兴
来源:
老年医学与保健 2014 年 20卷 6期
标签:
内皮祖细胞 过氧化氢 细胞增殖 Endothelial Progenitor Cells Hydrogen Peroxide Cell proliferation
目的 观察血管内皮生长因子-165(vascular endothelial growth factor-165,VEGF165)对过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)诱导的人外周血来源内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)增殖损伤及细胞周期相关蛋白表达的影响.方法 采用密度梯度离心法和贴壁培养法从人外周血中分离培养内皮祖细胞.在经MTT实验筛选出过氧化氢处理浓度后,对EPCs进行实验分组:正常对照组,不给予任何处理因素;VEGF165处理组,以终浓度为25ng/mL的VEGF165孵育24 h;过氧化氢处理,以终浓度200 μmol/L过氧化氢处理内皮祖细胞24 h;VEGF 165预处理组,经浓度为25 ng/mL的VEGF165预孵育30 min后,再与终浓度为200μmol/L的H2O2共孵育24 h.CCK-8法检测各组内皮祖细胞增殖活性的差异;Western blot分析各组内皮祖细胞中细胞周期相关蛋白cyclin D1和PCNA的蛋白表达情况.结果 与对照组相比,VEGF165处理组内皮祖细胞增殖活性增高(P<0.05);过氧化氢处理组内皮祖细胞增殖活性较对照组降低(P<0.05),且细胞周期相关蛋白cyclin Dl和PCNA下调(P<0.05); VEGF165预处理组中,EPCs增殖活性较过氧化氢处理组增高(P<0.05),且cyclin D1和PCNA蛋白表达上调(P<0.05).结论 VEGF165可促进人外周血来源的内皮祖细胞的增殖,对过氧化氢诱导的内皮祖细胞