目的 探讨血管内皮生长因子(vascular endothelial groth factor,VEGF)是否通过缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)调控内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)增殖迁移.方法 分离培养原代大鼠脾源性EPCs,不同浓度VEPF(0、10、50 ng/mL)刺激细胞,Western blot检测Cx43的表达.实验分3组:对照组、VEGF组、VEGF+siCx43组.荧光漂白恢复实验(fluorescence redistribution afterphotobleaching,FRAP)分别检测3 min内各组选定细胞荧光强度变化情况.CCK-8检测干扰Cx43蛋白表达对EPCs增殖的影响;Transwell小室迁移实验检测干扰Cx43蛋白表达对EPCs迁移的影响.结果 (1) VEGF促进EPCs中Cx43的表达(P<0.05),且有浓度依赖性.(2)与对照组相比,VEGF组缝隙连接功能明显增强(P<0.05);与VEGF组相比,VEGF+siCx43组缝隙连接功能明显降低(P<0.05).(3)与对照组相比,VEGF组促进EPCs增殖及迁移,差异有统计学意义(P<0.05);与VEGF组相比,VEGF+ siCx43组EPCs增殖及迁移活性明显降低(P<0.05).结论 VEGF可以通过上调EPCs中Cx43的表达,引起缝隙连接功能增强,从而促进内皮祖细胞的增殖及迁移.
作者:李禄丰;刘焕云;邓梦杨;徐春馨;赵晓辉
来源:第三军医大学学报 2016 年 38卷 2期