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目的:观察FOXO3a(forkhead box O3a)的活性改变对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)增殖和细胞周期相关蛋白表达的影响.方法:将携带突变激活FOXO3a基因的腺病毒载体Ad-TM (triple mutant)-FOXO3a和阴性对照腺病毒载体Ad-GFP体外感染人脐血来源的EPCs.观察EPCs形态学改变,CCK-8分析转染后EPCs增殖情况,Western blot检测FOXO3a蛋白、细胞周期相关蛋白p27kip1以及CDK2的表达水平.结果:构建了的2种腺病毒相关载体被成功转染.形态学改变方面,Ad-TM-FOXO3a组EPCs细胞生长缓慢,集落不明显;Western blot和CCK-8结果显示,Ad-TM-FOXO3a转染组与阴性对照组相比,EPCs增殖被抑制,FOXO3a与p27kip1蛋白过表达,CDK2表达下调.结论:FOXO3a可能通过上调p27kip1蛋白表达,下调CDK2表达,以抑制EPCs增殖.

作者:桑甜甜;曹青;王飞;黄黎亚;王玉强;陈书艳;刘芳;张建军

来源:现代生物医学进展 2014 年 14卷 24期

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作者:
桑甜甜;曹青;王飞;黄黎亚;王玉强;陈书艳;刘芳;张建军
来源:
现代生物医学进展 2014 年 14卷 24期
标签:
内皮祖细胞 腺病毒载体 细胞增殖 Endothelial progenitor cells Adenovirus vector Cell proliferation
目的:观察FOXO3a(forkhead box O3a)的活性改变对内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)增殖和细胞周期相关蛋白表达的影响.方法:将携带突变激活FOXO3a基因的腺病毒载体Ad-TM (triple mutant)-FOXO3a和阴性对照腺病毒载体Ad-GFP体外感染人脐血来源的EPCs.观察EPCs形态学改变,CCK-8分析转染后EPCs增殖情况,Western blot检测FOXO3a蛋白、细胞周期相关蛋白p27kip1以及CDK2的表达水平.结果:构建了的2种腺病毒相关载体被成功转染.形态学改变方面,Ad-TM-FOXO3a组EPCs细胞生长缓慢,集落不明显;Western blot和CCK-8结果显示,Ad-TM-FOXO3a转染组与阴性对照组相比,EPCs增殖被抑制,FOXO3a与p27kip1蛋白过表达,CDK2表达下调.结论:FOXO3a可能通过上调p27kip1蛋白表达,下调CDK2表达,以抑制EPCs增殖.