目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)促进气道上皮细胞合成、分泌胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)的作用及其机制,为治疗哮喘寻求新靶点.方法 体外培养人支气管上皮细胞(HBEc),传代后接种于6孔板中,待细胞生长至50％～70％时进行实验.研究1ng/ml TGF-β1刺激不同时间对HBEc中TSLP表达的影响时,按培养时间分为0、3、6、12、24、48h组.研究不同浓度TGF-β1刺激24h对HBEc中TSLP及其他蛋白表达的影响时,按TGF-β1浓度分为0、0.1、1、10ng/ml组.使用SB431542拮抗TGF-β1时共培养24h,根据处理因素不同分为空白对照组(培养基中不加处理因素)、TGF-β1组(加入1ng/ml TGF-β1)、TGF-β1+SB431542组(加入1ng/ml TGF-β1和10μmol/L SB431542).采用Western blotting检测细胞中TSLP、p-Smad3及Smad3蛋白的表达水平,实时荧光定量PCR检测细胞中TSLP mRNA的表达水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养上清液中TSLP的浓度.结果 随着与TGF-β1共培养时间的延长,HBEc中TSLP表达量逐渐增加,24h组TSLP蛋白质相对表达量(0.803±0.022)明显高于0h组(0.350±0.032,P<0.05),mRNA相对表达量也较0h组明显上升(4.957±0.391vs.1.002±0.086,P<0.05).1ng/ml TGF-β1组TSLP的mRNA转录水平(7.954±2.004)和蛋白表达水平(1.522±0.003)

作者：蔡亮鸣；叶慧清；杨丽芬；潘莉；黎雅婷；陈壮桂

来源：解放军医学杂志 2019 年 44卷 4期