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目的 通过检测Akt在大鼠心肌细胞退出细胞周期过程中的表达及Akt表达载体转染后大鼠心肌细胞有丝分裂的改变,探讨Akt对心肌细胞增殖的影响.方法 生后不同发育阶段和成年健康Wistar大鼠各5只,用RT-PCR和免疫印迹法,检测心肌组织Akt的mRNA和蛋白磷酸化水平改变;培养大鼠H9c2(2-1)心肌细胞,通过胰岛素刺激和真核表达载体pCIS2-Akt-WT转染两种方式激活细胞内Akt,采用免疫沉淀方法检测细胞内磷酸化组蛋白H3表达改变,观察Akt对心肌细胞有丝分裂的影响.结果 大鼠生后7d到2周心肌组织Akt mRNA表达和蛋白磷酸化水平明显下降(P<0.01),激活的Akt促使大鼠H9c2(2-1)心肌细胞磷酸化组蛋白H3表达显著增加(P<0.01).结论 Akt能促进可增殖心肌细胞的有丝分裂.

作者:邸菁;柏树令;张凌志

来源:解剖学报 2011 年 42卷 1期

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作者:
邸菁;柏树令;张凌志
来源:
解剖学报 2011 年 42卷 1期
标签:
Akt H9c2(2-1)心肌细胞 增殖 胰岛素 免疫印迹法 反转录聚合酶链反应 大鼠
目的 通过检测Akt在大鼠心肌细胞退出细胞周期过程中的表达及Akt表达载体转染后大鼠心肌细胞有丝分裂的改变,探讨Akt对心肌细胞增殖的影响.方法 生后不同发育阶段和成年健康Wistar大鼠各5只,用RT-PCR和免疫印迹法,检测心肌组织Akt的mRNA和蛋白磷酸化水平改变;培养大鼠H9c2(2-1)心肌细胞,通过胰岛素刺激和真核表达载体pCIS2-Akt-WT转染两种方式激活细胞内Akt,采用免疫沉淀方法检测细胞内磷酸化组蛋白H3表达改变,观察Akt对心肌细胞有丝分裂的影响.结果 大鼠生后7d到2周心肌组织Akt mRNA表达和蛋白磷酸化水平明显下降(P<0.01),激活的Akt促使大鼠H9c2(2-1)心肌细胞磷酸化组蛋白H3表达显著增加(P<0.01).结论 Akt能促进可增殖心肌细胞的有丝分裂.