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目的 探讨低氧化应激下肿瘤坏死因子α(TNF-α)过表达对牙髓干细胞(DPSCs)生物学性能的影响.方法 实验分组为常氧DPSCs组、常氧空载转染组、常氧TNF-α过表达组、DPSCs 3%O2组、空载DPSCs 3%O2组、TNF-α过表达3%O2组.牙髓干细胞复苏并培养,然后将慢病毒TNF-α转染细胞置于37℃、CO2培养箱培养,ELISA法检测各组细胞TNF-α的表达水平,RT-PCR检测TNF-α过表达氧化应激作用下的表达,Real-time PCR、Western blotting检测氧化应激作用下人DPSCs碱性磷酸酶(ALP)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)表达和MTT检测各组细胞TNF-α转染后细胞增殖情况.结果 Lentivirus-TNF-α转染细胞10 h后,即可在倒置荧光显微镜下观察到绿色荧光信号,TNF-α过表达可以使低氧环境中牙髓干细胞增殖能力增强,且低氧的微环境可以增加TNF-α的表达,使DPSCs可以进一步的表达TNF-α,而且TNF-α过表达3% O2时,Western blotting和Real-time PCR检测都表明DPSCs中ALP、DSPP表达差异具有显著性(P<0.05).结论 低氧微环境中DPSCs过表达TNF-α可以同时提高增殖效率和较高的分化效果.

作者:李伟;杨赣军;彭建安;胡红梅;周星辰

来源:解剖学报 2022 年 53卷 1期

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作者:
李伟;杨赣军;彭建安;胡红梅;周星辰
来源:
解剖学报 2022 年 53卷 1期
标签:
低氧化;肿瘤坏死因子-α;牙髓干细胞;免疫印迹法;人
目的 探讨低氧化应激下肿瘤坏死因子α(TNF-α)过表达对牙髓干细胞(DPSCs)生物学性能的影响.方法 实验分组为常氧DPSCs组、常氧空载转染组、常氧TNF-α过表达组、DPSCs 3%O2组、空载DPSCs 3%O2组、TNF-α过表达3%O2组.牙髓干细胞复苏并培养,然后将慢病毒TNF-α转染细胞置于37℃、CO2培养箱培养,ELISA法检测各组细胞TNF-α的表达水平,RT-PCR检测TNF-α过表达氧化应激作用下的表达,Real-time PCR、Western blotting检测氧化应激作用下人DPSCs碱性磷酸酶(ALP)、牙本质涎磷蛋白(DSPP)表达和MTT检测各组细胞TNF-α转染后细胞增殖情况.结果 Lentivirus-TNF-α转染细胞10 h后,即可在倒置荧光显微镜下观察到绿色荧光信号,TNF-α过表达可以使低氧环境中牙髓干细胞增殖能力增强,且低氧的微环境可以增加TNF-α的表达,使DPSCs可以进一步的表达TNF-α,而且TNF-α过表达3% O2时,Western blotting和Real-time PCR检测都表明DPSCs中ALP、DSPP表达差异具有显著性(P<0.05).结论 低氧微环境中DPSCs过表达TNF-α可以同时提高增殖效率和较高的分化效果.