目的:建立高分辨熔解曲线分析法(high-resolution melting analysis,HRMA),检测骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)患者中SF3B1基因的突变.方法:针对SF3B1基因热点突变位点(密码子E622、H662、K666和K700)设计PCR扩增引物,建立带有温度内标校准品的PCR扩增反应体系,对30例初诊MDS患者的骨髓标本进行PCR扩增,应用HRMA对相应PCR产物进行突变检测,并对HRMA检测结果进行DNA测序验证.结果:HRMA检测发现2例MDS患者存在异常的熔解曲线,经DNA测序验证1例为K666M杂合子突变,另l例为K700E杂合子突变.所建立的HRMA技术检测SF3B1基因突变的灵敏度为0.05(5％).结论:成功建立检测SF3B1基因突变的HRMA技术,可快速筛查MDS标本中的SF3B1基因突变.
作者：杨静；姚冬明；钱军；王翠竹；杨小飞；林江；李云；陈星星；肖高飞
来源：江苏大学学报（医学版） 2013 年 23卷 1期
