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目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)旁分泌因子肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对多柔比星诱导的H9C2细胞凋亡的影响及其机制.方法:将SD大鼠MSCs传代至第3代后分为未转染组、转染HGF-siRNA组及转染阴性对照(NC)-siRNA组,分别进行相应处理.通过ELISA、蛋白质印迹法检测各组MSCs细胞上清中及细胞中HGF、转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)含量和蛋白表达量.用浓度为1 μmol/L的多柔比星处理H9C2细胞4h后分为4组:单独培养组、MSCs共培养组、与HGF-siRNA-MSCs共培养组及与NC-siRNA-MSCs共培养组.培养24 h后通过流式细胞术Annexin V/PI双染法检测H9C2细胞凋亡率.结果:HGF-siRNA组MSCs上清中TGF-β1浓度为(519.23 ±24.34) pg/mL,明显高于未转染组[(459.65±11.78) pg/mL]及NC-siRNA组[(459.33±11.78) pg/mL](P均<0.05);转染HGF-siRNA组MSCs中TGF-β1表达量亦明显高于其他两组.HGF-siRNA-MSCs与H9C2细胞共培养组中H9C2细胞凋亡率为(18.54±0.64)%,较MSCs共培养组[(6.65±0.49)%]及NC-siRNA-MSCs共培养组[(9.70±1.62)%]明显增加(P均<0.05).结论:MSCs旁分泌因子HGF通过抑制TGF-β1的表达对多柔比星诱导的H9C2细胞凋亡起保护作用.

作者:刘玲玲;赵龙;李晓丽;张赢予;王好;周艳芳;张国辉

来源:江苏大学学报(医学版) 2014 年 24卷 3期

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作者:
刘玲玲;赵龙;李晓丽;张赢予;王好;周艳芳;张国辉
来源:
江苏大学学报(医学版) 2014 年 24卷 3期
标签:
骨髓间充质干细胞 旁分泌 肝细胞生长因子 转化生长因子-β1 细胞凋亡 多柔比星 mesenchymal stem cells paracrine hepatocyte growth factor transforming growth factor β1 apoptosis doxorubicin
目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)旁分泌因子肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对多柔比星诱导的H9C2细胞凋亡的影响及其机制.方法:将SD大鼠MSCs传代至第3代后分为未转染组、转染HGF-siRNA组及转染阴性对照(NC)-siRNA组,分别进行相应处理.通过ELISA、蛋白质印迹法检测各组MSCs细胞上清中及细胞中HGF、转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)含量和蛋白表达量.用浓度为1 μmol/L的多柔比星处理H9C2细胞4h后分为4组:单独培养组、MSCs共培养组、与HGF-siRNA-MSCs共培养组及与NC-siRNA-MSCs共培养组.培养24 h后通过流式细胞术Annexin V/PI双染法检测H9C2细胞凋亡率.结果:HGF-siRNA组MSCs上清中TGF-β1浓度为(519.23 ±24.34) pg/mL,明显高于未转染组[(459.65±11.78) pg/mL]及NC-siRNA组[(459.33±11.78) pg/mL](P均<0.05);转染HGF-siRNA组MSCs中TGF-β1表达量亦明显高于其他两组.HGF-siRNA-MSCs与H9C2细胞共培养组中H9C2细胞凋亡率为(18.54±0.64)%,较MSCs共培养组[(6.65±0.49)%]及NC-siRNA-MSCs共培养组[(9.70±1.62)%]明显增加(P均<0.05).结论:MSCs旁分泌因子HGF通过抑制TGF-β1的表达对多柔比星诱导的H9C2细胞凋亡起保护作用.