目的 构建人肝素酶蛋白的原核表达载体,表达并纯化重组人肝素酶蛋白和制备其单克隆抗体.方法 将人肝素酶cDNA克隆至原核表达载体pET30a(+), 经大肠杆菌表达、纯化后,获得的肝素酶纯化蛋白免疫小鼠,取其脾淋巴细胞与SP2/0细胞融合,制备能产生肝素酶单克隆抗体的杂交瘤细胞株,进一步采用Western blotting、ELISA等技术对制备的单克隆抗体进行初步鉴定.结果 原核表达重组质粒在大肠杆菌中能高效表达人肝素酶蛋白,并进一步从10株杂交瘤细胞中选取了3株能稳定分泌人肝素酶单抗的杂交瘤细胞株.结论 成功制备了3株人肝素酶特异性单克隆抗体.
作者：师红磊；陈伟；李宁；汤旭东；余松涛；王健；杨仕明
来源：实用临床医药杂志 2010 年 14卷 5期
