目的 利用原核蛋白表达载体,体外表达Mer的IgG样区,并利用此重组蛋白制备抗Mer的单克隆抗体.方法 从K562细胞中抽提总RNA,利用RT-PCR扩增Mer的IgG样区片断.经过测序将所得片断与PQE30原核表达载体连接并转化到大肠杆菌M15中,挑选阳性克隆,经诱导和纯化后获得原核蛋白.利用所得的重组蛋白免疫Balb/e小鼠,取其脾脏和小鼠杂交瘤细胞融合制备针对Mer的IgG样区的特异性抗体.利用ELISA方法筛选阳性克隆,Westernblot方法进行验证.结果 体外成功表达MerIgG样区的原核蛋白,片断大小经修饰后约为26 kd,表达量占菌体总蛋白的15
作者:范磊;沈飞;谢丽倩;周梦云;阮长耿
来源:苏州大学学报(医学版) 2007 年 27卷 1期