目的 探讨过表达乙酰肝素酶(HPSE)对胆囊癌细胞系GBC-SD细胞增殖及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(PI3 K/AKT)信号通路的影响.方法 构建HPSE真核表达载体,然后获得转基因过表达HPSE的胆囊癌细胞株GBD-SD.通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot分析GBC-SD和GBD-SD中HPSE mRNA和蛋白表达.通过集落形成实验、MTT来评估各组细胞的增殖情况.采用Western blot分析PI3 K/A KT信号通路相关蛋白(p-PBK、PBK、p-AKT和AKT)的水平.结果 成功转染后的GBD-SD中HPSE mRNA水平和蛋白水平升高,差异有统计学意义(P＜0.01).与正常表达HPSE的GBC-SD相比,过表达HPSE的GBD-SD细胞光密度(OD)值和集落形成能力提高,差异有统计学意义(P＜0.05).Western blot检测结果显示,与GBC-SD细胞相比,过表达HPSE的GBD-SD组细胞p-AKT、p-PI3K蛋白表达水平、p-AKT/AKT值和p-PI3 K/PI3K值增加,差异有统计学意义(P＜0.01),而总AKT和总PI3K蛋白表达水平无明显变化.GBC-SD细胞经PI3K/AKT通路特异性抑制剂LY294002处理2d后,其增殖能力和p-AKT/AKT值降低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 过表达HPSE能够促进GBC-SD细胞的增殖,这一效应可能与PI3K/AKT信号通路有关.

作者：闻波；刘子祥；张子艳；陈佳伟；王郑林；周少波

来源：实用临床医药杂志 2022 年 26卷 2期