目的:探讨LRP16基因促进MCF-7细胞增殖的分子生物学机制.方法:(1)将ERα模式启动子调控的荧光素酶报告子(3×ERE-Luc)与ERα,LRP16真核表达载体共转染MCF-7细胞,测定3×ERE-Luc的相对荧光素酶活性;(2)将3×ERE-Luc,ERα真核表达载体、针对LRP16的小干扰RNA(LRP16-siRNA374,LRP16-siRNA668)或对照小干扰RNA(control-siRNA)共转染MCF-7细胞,测定3×ERE-Luc的相对荧光素酶活性;(3)用Northern 印迹与Western 印迹方法检测抑制LRP16基因后MCF-7细胞中ERα下游靶基因对雌激素刺激的反应性.结果:(1)LRP16增强3×ERE-Luc的相对荧光素酶活性,并呈现剂量依赖性,该效应依赖于雌激素对ERα的激活;(2)Northern 印迹结果显示,抑制LRP16表达限制了雌激素对ERα下游靶基因表达水平的刺激上调,包括E2F1、视黄酸受体(RARα)、c-fos和MTA3,但没有影响组织蛋白酶D(cathepsin D)的反应性;Western 印迹结果显示,抑制LRP16限制了雌激素对细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的刺激.结论: (1)雌激素反应性靶基因LRP16反馈增强ERα介导的转录激活活性;(2)LRP16基因通过增强ERα介导的转录激活活性调节其下游靶基因的表达,主要通过改变cyclin D1的水平促进MCF-7细胞的增殖.

作者：臧丽；韩为东；母义明；伍志强；李琦；赵亚力；陆菊明；潘长玉

来源：军事医学科学院院刊 2006 年 30卷 6期