目的:建立酶联免疫吸附分析方法( ELISA )检测待测样品中的人源化抗体MIL50。方法用原核表达的重组蓖麻毒素( ricin) A链( RTA)突变体( RiVax)为包被抗原,与辣根过氧化物酶( HRP)标记的羊抗人IgG建立的夹心ELISA,检测生物样品中的人源化抗体MIL50。结果以蓖麻毒素和RiVax包被抗原,ELISA检测MIL50的结果显示,RiVax可与MIL50特异性结合,结合能力不低于全毒素蛋白,可以用于MIL50的定量分析。 RiVax的包被浓度为3 mg/L,对于溶解于含有吐温20(Tween 20)磷酸缓冲液(PBST)中的MIL50的检测灵敏度可达0.030 mg/L;与PBST样品相比较,含有同样浓度MIL50的大鼠血清ELISA的阳性结果明显减弱,不同的大鼠组织匀浆对于MIL50的检测有不同程度的干扰。结论夹心ELISA能够有效地用于人源化蓖麻毒素抗体MIL50的检测分析。
作者:邬一凡;贾培媛;武军华;周建平;李海霞;吕明
来源:军事医学 2013 年 11期