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目的:克隆表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)融合抗原ESAT-6+CFP-10(EC),评价融合抗原EC刺激THP-1细胞培养上清中特定细胞因子分泌水平的变化。方法构建融合抗原EC原核表达载体,用纯化后的不同浓度融合抗原EC (10,20μg/ml )刺激THP-1细胞,分别收集刺激12和24 h细胞培养上清,采用Bio-PlexProTM Assays细胞因子测定试剂盒检测细胞培养上清中IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、GM-CSF、TNF-α和IFN-γ的分泌水平。结果成功克隆表达此菌EC融合抗原;经过融合抗原EC刺激THP-1细胞培养上清中IL-6、IL-8和TNF-α的分泌水平明显升高,差异具有统计学意义( P<0.05),其余细胞因子的分泌水平在刺激前后没有显著变化。结论克隆表达的融合抗原EC具有生物学活性,能使THP-1细胞分泌的IL-6、IL-8及TNF-α水平升高。

作者:赵琰枫;冯晓燕;修冰水;段翠密;范雅文;张贺秋

来源:军事医学 2016 年 40卷 3期

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作者:
赵琰枫;冯晓燕;修冰水;段翠密;范雅文;张贺秋
来源:
军事医学 2016 年 40卷 3期
标签:
分枝杆菌,结核 ESAT-6+CFP-10融合抗原 THP-1细胞 细胞因子类 Mycobacterium tuberculosis ESAT-6 and CFP-10 fusion antigen THP-1 cell cytokines
目的:克隆表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)融合抗原ESAT-6+CFP-10(EC),评价融合抗原EC刺激THP-1细胞培养上清中特定细胞因子分泌水平的变化。方法构建融合抗原EC原核表达载体,用纯化后的不同浓度融合抗原EC (10,20μg/ml )刺激THP-1细胞,分别收集刺激12和24 h细胞培养上清,采用Bio-PlexProTM Assays细胞因子测定试剂盒检测细胞培养上清中IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、GM-CSF、TNF-α和IFN-γ的分泌水平。结果成功克隆表达此菌EC融合抗原;经过融合抗原EC刺激THP-1细胞培养上清中IL-6、IL-8和TNF-α的分泌水平明显升高,差异具有统计学意义( P<0.05),其余细胞因子的分泌水平在刺激前后没有显著变化。结论克隆表达的融合抗原EC具有生物学活性,能使THP-1细胞分泌的IL-6、IL-8及TNF-α水平升高。