目的 初步探讨miR-17介导低氧诱导间充质干细胞(MSC)分泌促血管生长因子的作用与机制.方法 通过骨髓渣粒贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞(BM-MSC),流式细胞术鉴定细胞纯度.通过实时定量PCR(qRT-PCR)检测低氧诱导BM-MSC细胞miR-17-92簇各成员的表达.通过Western印迹检测低氧诱导BM-MSC细胞后低氧诱导因子-1α(HIF-1α)的蛋白表达及ELISA方法检测肝细胞生长因子(HGF)、血管内皮生长因子(VEGF)和血管生成素-1(ANG-1)的分泌水平.通过CCK-8方法检测过表达miR-17-92簇对BM-MSC的增殖作用.通过荧光素酶报告基因的方法验证HIF-1α是否为miR-17的靶标.结果 检测到BM-MSC在低氧条件下miR-17、miR-18和miR-19表达下调.同时,多个促血管生长因子(如HGF、VEGF和ANG-1等)分泌明显增加.进一步研究表明,miR-17抑制剂促进BM-MSC中HGF和VEGF的分泌.另外,过表达miR-17-92在常氧和低氧条件下均促进BM-MSC的生长.通过双重荧光素酶报告基因方法验证HIF-1α为miR-17的靶标.miR-17模拟物转染导致BM-MSC中HIF-1α表达下调.结论 低氧抑制miR-17的表达并通过靶基因HIF-1α调控BM-MSC促血管生成相关生长因子的分泌,从而调控BM-MSC的促血管生成活性.
作者：徐芹芹；孙慧燕；高川成；王立生；格日力；肖凤君
来源：军事医学 2020 年 44卷 11期
