目的 构建人热休克蛋白B6 (HspB6)重组表达载体,初步研究其生物学活性.方法 采用RT PCR法扩增HspB6 CDS段序列,并将扩增产物与小鼠Fc片段融合成重组基因HspB6/mFc,测序正确后插入蛋白表达载体pCEP4,随后转染人肾上皮293T细胞.扩增培养后收集细胞上清液用于浓缩、纯化以及Western blot验证.采用CCK-8法和Transwell实验分别检测HspB6/mFc融合蛋白对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和迁移的影响.结果 成功构建pCEP4/HspB6/mFc重组载体,并获得稳定表达HspB6/mFc融合蛋白的293T细胞.HspB6/mFc融合蛋白能明显促进HUVEC增殖和迁移.结论 pCEP4/HspB6/mFc重组载体及稳定表达的HspB6/mFc融合蛋白为进一步研究HspB6的生物学功能提供物质基础.
作者：陈惠康；陆培荣；张济明；钱益勇；刘高勤；罗宝根；费梅
来源：江苏医药 2014 年 40卷 18期
