目的观察血管紧张素1型受体相关蛋白配体(apelin-13)对损伤心肌细胞自噬的影响,探讨其可能的作用机制.方法体外培养3 d龄内的SD乳鼠心肌细胞,通过葡萄糖剥夺(glucose deprivation,GD)方法建立心肌细胞损伤模型,将细胞随机分为5组:正常对照组(Control组)、葡萄糖剥夺组(GD组)、Apelin-13预处理组(GD+Apelin-13组)、Tricribine+Apelin-13预处理组(GD+Apelin-13+Tricribine组)和阻断剂组(Tricribine组).采用透射电镜观察细胞内自噬体的变化,免疫沉淀脂质激酶分析法检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的活性,Western-blotting法检测细胞内自噬相关蛋白-微管相关蛋白1轻链3(LC3)的表达,以及信号通路相关蛋白Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR的表达.结果葡萄糖剥夺可诱导乳鼠心肌细胞自噬体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值增加(P<0.01);Apelin-13预处理能减轻葡萄糖剥夺引起的心肌细胞损伤,使自噬体数量、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值下降,提高PI3K的活性,上调Akt、mTOR蛋白的磷酸化水平(P<0.01);Akt特异性阻断剂Tricribine可以使Apelin-13的上述保护作用减弱(P<0.01).结论 Apelin-13在一定程度上可以抑制GD诱导的心肌细胞自噬,机制可能与激活PI3K/Akt/mTOR信号通路有关.
作者：焦慧；张志；马清华；付伟
来源：解放军医学院学报 2013 年 2期
