目的：探讨结直肠肿瘤干细胞在体外分化过程中细胞形态、干细胞及转移相关标志物表达和转移侵袭能力的变化，为进一步研究结直肠肿瘤干细胞分化走向及转移侵袭能力改变提供实验依据。方法取来源于人结直肠癌的细胞系 HCT116，无血清培养分离出 CD133＋细胞，加血清诱导分化，相差显微镜下观察其形态变化；在未分化状态下无血清培养第7天和14天与血清诱导分化后收集细胞，利用流式细胞仪检测干细胞标志物 CD133＋其表达量，采用激光共聚焦、RT-PCR 和免疫荧光检测 CD133＋、N-cadherin 及 Vimentin 表面标记分子的表达，Tr-answell 小室检验 CD133＋细胞的转移侵袭能力。结果（1）细胞形态：无血清培养分离的 CD133＋细胞，在生长过程中聚集成规则的细胞球，血清诱导后即贴壁生长，贴壁形态与同来源细胞形态一致，且再次无血清悬浮培养后聚集成球稳定生长。（2）标志物变化：结直肠肿瘤干细胞未分化时 CD133＋、N-cadherin 及 Vimentin 表面标记分子均高表达，流式细胞仪检测未分化细胞 CD133第7天表达率为（20．4±0．52）％，第14天表达率为（78．5±2．80）％，分化后表达率为（0．50±0．17）％。（3）转移侵袭能力：CD133＋细胞穿过孔膜细胞数为104．67±14．64，显著高于血清诱导的分化细胞28．67±
作者：贾健锋；贺长林
来源：检验医学与临床 2014 年 z1期
