目的 探讨脂多糖(LPS)刺激肺泡上皮细胞(RLE-6TN)分泌的外泌体对肺泡巨噬细胞(NR8383)的致炎效应.方法 运用Transwell共培养体系,将经过不同处理的RLE-6TN细胞(正常组、LPS刺激组、外泌体抑制剂组、外泌体抑制剂预处理+LPS刺激组)分别与NR8383细胞共培养,NR8383细胞单培养作为空白对照组,共培养12 h后利用荧光定量PCR(qPCR)法检测各组NR8383细胞中IL-6、TNF-α、IL-1β 的mRNA相对表达量.为进一步探讨肺泡上皮细胞分泌的外泌体对NR8383炎症反应的影响,采用差速超速离心法分别提取实验组外泌体(LPS刺激RLE-6TN细胞分泌的外泌体)和对照组外泌体(正常RLE-6TN细胞分泌的外泌体),运用透射电镜、蛋白免疫印迹鉴定外泌体,用qNano粒子直径分析仪检测外泌体粒子直径.将NR8383细胞分为实验组,对照组,PBS组,分别加入外泌体悬液(10μg/mL,实验组和对照组)和等体积的PBS,培养12 h后,用激光共聚焦显微镜观察NR8383细胞对外泌体的吞噬,用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测细胞上清液中炎症因子的IL-1β、TNF-α、IL-6的表达水平.结果 ①Transwell共培养实验中,与空白对照组相比,LPS组的炎症因子mRNA相对表达量显著升高(P<0.01),而与LPS组相比,外泌体抑制剂预处理+LPS组的炎症因子mRNA相对表达量却明显降低(P<0.01);②提取的外

作者：丁成志；彭巍；李勇；杨云；邵强；赵宁；陈家泉；钱克俭；刘芬

来源：中华急诊医学杂志 2018 年 27卷 10期