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目的 探讨雌激素相关受体α(estrogen-related receptor alpha,ERRα)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)炎症反应的影响及其机制.方法 体外培养PMVECs细胞株,当细胞处于对数生长期时利用慢病毒转染细胞,并构建稳定低表达的ERRα细胞株.将细胞分别为四组:正常对照组(Ctr组)、正常细胞+LPS处理组(Ctr+LPS组)、shERRα 1基因敲低组(shERRα 1组)和shERRα 1基因敲低组+LPS处理组(shERRα1+LPS组).予20μg/mL的LPS分别刺激对照组和基因敲低组细胞6、12和24 h后,应用cell counting kit-8(cck-8)检测各组细胞的增殖能力;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β (IL-1 β)的浓度,于LPS刺激12 h后采用Western blot检测各组细胞ERRα及NF-κ B通路的相关蛋白(p-p65、p65、P-IKB α、IKBα)的表达水平.两组变量比较采用SNK-q检验,多组变量比较采用单因素方差分析,方差不齐时则用秩转换的非参数检验.以P<0.05为差异有统计学意义.结果 与对照组相比,shERRα1组ERRα蛋白的表达量明显降低(0.09±0.01 vs 0.15±0.01);于LPS刺激6、12和24 h后,与对照组相比,shERRα1+LPS组细胞增殖能力明显降低[

作者:夏文芳;潘舟;张桓铭;李光;周青山

来源:中华急诊医学杂志 2020 年 29卷 1期

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作者:
夏文芳;潘舟;张桓铭;李光;周青山
来源:
中华急诊医学杂志 2020 年 29卷 1期
标签:
脓毒症 雌激素相关受体α NF-κB通路 基因敲低 Sepsis Estrogen-related receptor alpha NF-κB pathway Gene knockdown
目的 探讨雌激素相关受体α(estrogen-related receptor alpha,ERRα)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)炎症反应的影响及其机制.方法 体外培养PMVECs细胞株,当细胞处于对数生长期时利用慢病毒转染细胞,并构建稳定低表达的ERRα细胞株.将细胞分别为四组:正常对照组(Ctr组)、正常细胞+LPS处理组(Ctr+LPS组)、shERRα 1基因敲低组(shERRα 1组)和shERRα 1基因敲低组+LPS处理组(shERRα1+LPS组).予20μg/mL的LPS分别刺激对照组和基因敲低组细胞6、12和24 h后,应用cell counting kit-8(cck-8)检测各组细胞的增殖能力;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β (IL-1 β)的浓度,于LPS刺激12 h后采用Western blot检测各组细胞ERRα及NF-κ B通路的相关蛋白(p-p65、p65、P-IKB α、IKBα)的表达水平.两组变量比较采用SNK-q检验,多组变量比较采用单因素方差分析,方差不齐时则用秩转换的非参数检验.以P<0.05为差异有统计学意义.结果 与对照组相比,shERRα1组ERRα蛋白的表达量明显降低(0.09±0.01 vs 0.15±0.01);于LPS刺激6、12和24 h后,与对照组相比,shERRα1+LPS组细胞增殖能力明显降低[