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目的 探讨miR-200对非小细胞肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其与程序性死亡受体配体-1(Programmed death-ligand 1,PD-L1)的靶向关系.方法 选取非小细胞肺癌细胞株A549,正常肺成纤维细胞HLF-1为研究对象,根据A549细胞转染物质的不同,分为NC组(未进行任何处理的A549细胞)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-200组(转染miR-200-mimic)、si-NC组(转染si-NC)、si-PD-L1组(转染si-PD-L1)、miR-200+ pEGFP组(转染miR-200-mimic+ pEGFP)及miR-200+ pEGFP-PD-L1组(转染miR-200-mimic+ pEGFP-PD-L1).采用实时荧光定量PCR法检测细胞中miR-200表达水平;MTT检测细胞增殖能力;Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;Western blot检测细胞PD-L1表达水平;荧光素酶实验验证miR-200与PD-L1的靶向关系.结果 与HLF-1相比,A549细胞胞miR-200表达水平降低,PD-L1基因、蛋白表达升高(P<0.05).48和72 h时,miR-200组细胞活力、迁移和侵袭数量明显低于NC组、miR-NC组(P<0.05).48和72 h时,si-PD-L1组细胞活力、迁移和侵袭数量明显低于NC组、si-NC组(P<0.05).miR-200+pcDNA-PD-L1组细胞48、72 h时细胞活力、细胞迁移和侵袭数量高于miR-200+ pcDNA组、miR-200组(P<0.05).与对照组相比,A549细胞PD-L1野生型质粒组荧光素酶活性

作者:艾孜子·阿不来提;艾力江·多力坤;陈康

来源:临床肺科杂志 2021 年 26卷 10期

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作者:
艾孜子·阿不来提;艾力江·多力坤;陈康
来源:
临床肺科杂志 2021 年 26卷 10期
标签:
miR-200;PD-L1;非小细胞肺癌;迁移;侵袭
目的 探讨miR-200对非小细胞肺癌A549细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其与程序性死亡受体配体-1(Programmed death-ligand 1,PD-L1)的靶向关系.方法 选取非小细胞肺癌细胞株A549,正常肺成纤维细胞HLF-1为研究对象,根据A549细胞转染物质的不同,分为NC组(未进行任何处理的A549细胞)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-200组(转染miR-200-mimic)、si-NC组(转染si-NC)、si-PD-L1组(转染si-PD-L1)、miR-200+ pEGFP组(转染miR-200-mimic+ pEGFP)及miR-200+ pEGFP-PD-L1组(转染miR-200-mimic+ pEGFP-PD-L1).采用实时荧光定量PCR法检测细胞中miR-200表达水平;MTT检测细胞增殖能力;Transwell小室实验检测细胞迁移、侵袭能力;Western blot检测细胞PD-L1表达水平;荧光素酶实验验证miR-200与PD-L1的靶向关系.结果 与HLF-1相比,A549细胞胞miR-200表达水平降低,PD-L1基因、蛋白表达升高(P<0.05).48和72 h时,miR-200组细胞活力、迁移和侵袭数量明显低于NC组、miR-NC组(P<0.05).48和72 h时,si-PD-L1组细胞活力、迁移和侵袭数量明显低于NC组、si-NC组(P<0.05).miR-200+pcDNA-PD-L1组细胞48、72 h时细胞活力、细胞迁移和侵袭数量高于miR-200+ pcDNA组、miR-200组(P<0.05).与对照组相比,A549细胞PD-L1野生型质粒组荧光素酶活性