目的：克隆 Tp0821、Tp0319、Tp0971、Tp0663基因，构建原核表达质粒，进行重组蛋白的表达、纯化并用于检测梅毒病人血清抗体。方法从 Tp 库中筛选 Tp0821、Tp0319、Tp0971、Tp0663四种膜蛋白，通过生物信息学软件分析挑选优势抗原表位，与 pQE32载体进行连接分别构建 pQE32/ Tp0821、pQE32/ Tp0319、pQE32/ Tp0971和 pQE32/Tp0663原核表达重组体；进行体外克隆表达与纯化，并分别以单一的 Tp0821、Tp0319、Tp0971、Tp0663及四种重组蛋白嵌合抗原（Tp0821- Tp0319- Tp0971- Tp0663）为包被抗原建立间接 Tp - ELISA 方法，以 TRUST 和 TPPA 法为对照，检测160例 Tp 阴性和83例 Tp 阳性临床标本，评价其在梅毒血清学诊断中应用。结果成功构建原核表达载体 pQE32/Tp0821、pQE32/ Tp0319、pQE32/ Tp0971和 pQE32/ Tp0663；高效表达和纯化出各自相对分子质量的重组蛋白。建立的间接 Tp - ELISA 法检测160例 Tp 阴性和83例 Tp 阳性临床标本，与 TPPA 相比，敏感度分别为85.5％（71/83）、84.3％（70/83）、89.2％（74/83）、81.9％（68/83）及95.2％（79/83），特异度均为100％（160/160），符合率为82.6％~95.7％。单一的 Tp0821、Tp0319、Tp0971和 Tp0663重组蛋白建立的 TP - ELISA 的检出率与 TPPA 法的检出

作者：阳建；杨荣志；唐诚

来源：临床和实验医学杂志 2015 年 6期