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目的 观察外源性第10号染色体同源缺失磷酸酶和张力蛋白(PTEN)基因对人肺癌细胞株SPC-A-1增殖、凋亡及侵袭的影响,并初步探讨其调控机制.方法 取对数期SPC-A-1细胞转染重组腺病毒Ad-PTENGFP、Ad-GFP,分别设为PTEN组、空载组,并检测转染效率,另取不做处理为对照组.MTT法检测并对比各组细胞增殖情况;Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡情况;Transwell试验检测细胞侵袭能力;分别采用实时荧光定量PCR法、蛋白免疫印迹法检测并对比各组细胞中PTEN mRNA和蛋白、粘着斑激酶(FAK)、蛋白激酶B(AKT)mRNA表达情况及p FAK/FAK、p AKT/AKT.结果 FACS法检测重组腺病毒Ad-PTEN-GFP、Ad-GFP对SPC-A-1细胞转染效率分别为(82.41±5.46)%、(83.02±6.20)%.PENT组MTT试验不同时刻OD值显著低于对照组和空载组(P <0.05),3组OD值均随时间延长呈显著升高趋势(P <0.05);Hoechst 33342荧光染色发现,对照组和空载组细胞形态正常,呈弥散均匀荧光,PTEN组部分细胞核浓染,呈月牙形聚集、颗粒状荧光碎片,PENT组细胞凋亡率显著高于对照组和空载组(P <0.05);PENT组细胞侵袭数目显著少于对照组和空载组(P <0.05);对照组和空载组OD值、凋亡率及细胞侵袭数目比较差异均无显著性(P> 0.05);与对照组和空载组比较,PENT组PENT mRNA和蛋白

作者:向薇;梅永添;方诗容;谭荣

来源:临床和实验医学杂志 2019 年 18卷 6期

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向薇;梅永添;方诗容;谭荣
来源:
临床和实验医学杂志 2019 年 18卷 6期
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肺癌 第10号染色体同源缺失磷酸酶和张力蛋白基因 增殖 凋亡 侵袭 Lung cancer Lack of chromosome 10 and tension homologous protein phosphatase Proliferation Apoptosis Invasion
目的 观察外源性第10号染色体同源缺失磷酸酶和张力蛋白(PTEN)基因对人肺癌细胞株SPC-A-1增殖、凋亡及侵袭的影响,并初步探讨其调控机制.方法 取对数期SPC-A-1细胞转染重组腺病毒Ad-PTENGFP、Ad-GFP,分别设为PTEN组、空载组,并检测转染效率,另取不做处理为对照组.MTT法检测并对比各组细胞增殖情况;Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡情况;Transwell试验检测细胞侵袭能力;分别采用实时荧光定量PCR法、蛋白免疫印迹法检测并对比各组细胞中PTEN mRNA和蛋白、粘着斑激酶(FAK)、蛋白激酶B(AKT)mRNA表达情况及p FAK/FAK、p AKT/AKT.结果 FACS法检测重组腺病毒Ad-PTEN-GFP、Ad-GFP对SPC-A-1细胞转染效率分别为(82.41±5.46)%、(83.02±6.20)%.PENT组MTT试验不同时刻OD值显著低于对照组和空载组(P <0.05),3组OD值均随时间延长呈显著升高趋势(P <0.05);Hoechst 33342荧光染色发现,对照组和空载组细胞形态正常,呈弥散均匀荧光,PTEN组部分细胞核浓染,呈月牙形聚集、颗粒状荧光碎片,PENT组细胞凋亡率显著高于对照组和空载组(P <0.05);PENT组细胞侵袭数目显著少于对照组和空载组(P <0.05);对照组和空载组OD值、凋亡率及细胞侵袭数目比较差异均无显著性(P> 0.05);与对照组和空载组比较,PENT组PENT mRNA和蛋白