目的 应用作者构建的同时携带人肿瘤坏死因子相关的诱导凋亡配体(hTRAIL)基因和萤火虫荧光素酶(lue)基因的腺病毒双表达载体(Ad-hTRAIL-lue),以luc为报告基因,体外监测hTRAIL基因的表达及其作用.方法 携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的腺病毒载体(Ad-EGFP)以不同感染复数(MOI)感染肺癌A549细胞,48 h后检测腺病毒载体的感染效率.Ad-hTRAIL-luc分别以不同MOI感染A549细胞,用流式细胞仪48 h后分别检测hTRAIL的表达率及A549细胞的凋亡率;用液闪计数仪检测荧光素酶发光的每分钟计数(cpm).携带luc基因的腺病毒载体(Ad-luc)以不同MOI感染A549细胞,48 h后枪测荧光素酶发光的cpm值.Ad-hTRAIL-luc转染A549细胞后,对各组细胞的hTRAIL表达率及细胞凋亡率结果(自然对数转换后)、cpm值结果进行完全随机设计资料的方差分析,并对hTRAIL表达率及细胞凋亡率的2组数据进行直线相关分析.对Ad-EGFP感染后阳性率及Ad-luc感染后cpm值进行完伞随机设计多样本比较的秩和检验.结果 Ad-hTRAIL-luc转染A549细胞后,各组hTRAIL基因的表达率经自然对数转换后分别为(2.37 ± 0.04)/、(3.16±0.03)/、(3.64±0.03)/、(3.96±0.02)/、(4.24±0.02)/、(4.34±0.02)/,各组间差异具有统计学意义(F=7364,P<0.01),两两比较差异均有统计学意义(
作者:赵纳;崔建岭;郭志远;郭志萍;孙英彩;刘计存
来源:中华放射学杂志 2009 年 43卷 1期