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目的 探讨Notch2在生长激素腺瘤侵袭中的作用以及对上皮-间质转化(EMT)相关基因的影响.方法 回顾性分析2013年1月至2015年12月首都医科大学附属北京天坛医院收治的62例生长激素腺瘤,按照Knosp分级分为侵袭组(28例)和非侵袭组(34例).应用免疫组织化学染色检测Notch2和Vimentin在生长激素腺瘤中的表达情况,并分析两者的相关性.将小鼠垂体瘤细胞(GT1-1)分为对照组、空载体组和干扰组(Sh-A、Sh-B、Sh-C、Sh-D).干扰组使用Sh-A、Sh-B、Sh-C、Sh-D 4种片段在GT1-1细胞中干扰Notch2的表达并选择干扰效果最佳的两种进行后续实验.采用MTS法检测GT1-1细胞增殖能力,采用小室实验检测GT1-1细胞的侵袭能力,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测GT1-1细胞培养上清中生长激素(GH)水平,采用实时定量-PCR(RT-PCR)实验检测EMT相关基因的mRNA水平.结果 免疫组织化学染色显示在生长激素腺瘤中,Notch2的表达水平与Vimentin呈正相关(r=0.456,P=0.027).Notch2在侵袭组中的表达水平较非侵袭组明显升高(P<0.05).同样,侵袭组Vimentin表达水平较非侵袭组水平明显升高(P<0.05).RT-PCR和Western blotting实验筛选出干扰Notch2表达的有效片段为Sh-B和Sh-C.MTS实验显示,与对照组比较,Sh-B组细胞活力24 h、48 h和72 h时分别下降(6.8±2.1)%、(29.

作者:李振业;张鹏飞;高华;桂松柏;李储忠;姚晓辉;龚磊

来源:临床和实验医学杂志 2020 年 19卷 9期

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作者:
李振业;张鹏飞;高华;桂松柏;李储忠;姚晓辉;龚磊
来源:
临床和实验医学杂志 2020 年 19卷 9期
标签:
生长激素腺瘤 Notch2 上皮-间质转化 侵袭 迁移
目的 探讨Notch2在生长激素腺瘤侵袭中的作用以及对上皮-间质转化(EMT)相关基因的影响.方法 回顾性分析2013年1月至2015年12月首都医科大学附属北京天坛医院收治的62例生长激素腺瘤,按照Knosp分级分为侵袭组(28例)和非侵袭组(34例).应用免疫组织化学染色检测Notch2和Vimentin在生长激素腺瘤中的表达情况,并分析两者的相关性.将小鼠垂体瘤细胞(GT1-1)分为对照组、空载体组和干扰组(Sh-A、Sh-B、Sh-C、Sh-D).干扰组使用Sh-A、Sh-B、Sh-C、Sh-D 4种片段在GT1-1细胞中干扰Notch2的表达并选择干扰效果最佳的两种进行后续实验.采用MTS法检测GT1-1细胞增殖能力,采用小室实验检测GT1-1细胞的侵袭能力,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测GT1-1细胞培养上清中生长激素(GH)水平,采用实时定量-PCR(RT-PCR)实验检测EMT相关基因的mRNA水平.结果 免疫组织化学染色显示在生长激素腺瘤中,Notch2的表达水平与Vimentin呈正相关(r=0.456,P=0.027).Notch2在侵袭组中的表达水平较非侵袭组明显升高(P<0.05).同样,侵袭组Vimentin表达水平较非侵袭组水平明显升高(P<0.05).RT-PCR和Western blotting实验筛选出干扰Notch2表达的有效片段为Sh-B和Sh-C.MTS实验显示,与对照组比较,Sh-B组细胞活力24 h、48 h和72 h时分别下降(6.8±2.1)%、(29.