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目的 探究鸡内金提取物通过调节肺泡巨噬细胞自噬水平减轻尘肺大鼠肺间质纤维化的机制.方法 选择30只雄性SD大鼠根据随机数字表法分为3组,每组10只.对照组为没有粉尘接触的健康SD大鼠;模型组采用一次性除尘方法建立大鼠矽肺模型;治疗组采用一次性除尘方法建立大鼠矽肺模型,每天灌服鸡内金提取物0.2 g.定量逆转录PCR(RT-qPCR)分析自噬相关基因(Beclin、LC3-Ⅱ和LC3-Ⅰ)和凋亡相关基因(Bcl-2)的mRNA表达.培养后6、12、24 h,MTT检测巨噬细胞的活力.培养后12、24 h,通过划痕实验测定细胞的划痕间隙距离.酶联免疫吸附试验法检测促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平.蛋白质印迹检测大鼠肺部纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-12(MMP-12)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和重组人精氨酸酶1(Arg1)的蛋白表达.结果 模型组大鼠Beclin、LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA表达、IL-1β和TNF-α水平以及纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、MMP-9、MMP-12蛋白和iNOS蛋白表达水平均较对照组显著升高,Bcl-2 mRNA和Arg1蛋白表达水平均较对照组显著降低(P<0.05),治疗组大鼠Beclin、LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA表达、IL-1β和TNF-α水平以及纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、MMP-9、MMP-12蛋白和iNOS蛋白表达水平

作者:李叶;孟伟明;赵雪梅

来源:临床和实验医学杂志 2021 年 20卷 8期

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作者:
李叶;孟伟明;赵雪梅
来源:
临床和实验医学杂志 2021 年 20卷 8期
标签:
大鼠 鸡内金提取物 肺泡巨噬细胞 自噬 尘肺 纤维化
目的 探究鸡内金提取物通过调节肺泡巨噬细胞自噬水平减轻尘肺大鼠肺间质纤维化的机制.方法 选择30只雄性SD大鼠根据随机数字表法分为3组,每组10只.对照组为没有粉尘接触的健康SD大鼠;模型组采用一次性除尘方法建立大鼠矽肺模型;治疗组采用一次性除尘方法建立大鼠矽肺模型,每天灌服鸡内金提取物0.2 g.定量逆转录PCR(RT-qPCR)分析自噬相关基因(Beclin、LC3-Ⅱ和LC3-Ⅰ)和凋亡相关基因(Bcl-2)的mRNA表达.培养后6、12、24 h,MTT检测巨噬细胞的活力.培养后12、24 h,通过划痕实验测定细胞的划痕间隙距离.酶联免疫吸附试验法检测促炎因子白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平.蛋白质印迹检测大鼠肺部纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶-12(MMP-12)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和重组人精氨酸酶1(Arg1)的蛋白表达.结果 模型组大鼠Beclin、LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA表达、IL-1β和TNF-α水平以及纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、MMP-9、MMP-12蛋白和iNOS蛋白表达水平均较对照组显著升高,Bcl-2 mRNA和Arg1蛋白表达水平均较对照组显著降低(P<0.05),治疗组大鼠Beclin、LC3-Ⅱ/LC3-ⅠmRNA表达、IL-1β和TNF-α水平以及纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白、MMP-9、MMP-12蛋白和iNOS蛋白表达水平