目的 探讨以蛋白L(protein L)为基础的流式细胞染色方法用于检测患者T细胞表面嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)表达的技术可行性.方法 单采2例CD19阳性淋巴瘤患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),磁珠分选法获得T细胞,加入靶向CD19、CD22的CAR逆转录病毒,转染、诱导培养成CAR-T细胞.通过生物素化蛋白L(biotinylated protein L)-亲合素(streptavidin-PE)系统对CAR-T细胞表面的单链抗体片段(single-chain variable fragment,scFv)进行标记,用流式细胞术检测活化培养的T细胞中CD19-CAR、CD22-CAR表达阳性T细胞的比例,以常规Anti-IgG 染色的流式细胞检测方法作为对照组,进行结果对比.结果 scFv-biotinylated protein L-streptavidin-PE-流式细胞染色方法能够检测到CAR-T细胞表面CAR表达.2例患者蛋白L实验组和Anti-IgG对照组CD19-CAR-T细胞比例分别为71.6％ vs64.2％和49.3％ vs 43.8％;CD22-CAR-T细胞比例分别为53.1％ vs 46.3％和56.5％ vs 64.0％,测定结果相似.结论 以蛋白L为基础的染色方法可以作为流式细胞术检测CAR-T细胞的常规染色方法.
作者：邓海峰；韩为东；蒋敬庭
来源：临床检验杂志 2018 年 36卷 4期
