目的 建立并评价多重PCR联合毛细管电泳技术(mPCR?CE)同时检测碳青霉烯酶基因blaKPC、blaNDM、blaOXA?48和blaVIM的方法.方法 设计特异性引物,建立多重PCR扩增体系,利用毛细管电泳检测扩增产物.以携带blaKPC、blaNDM、blaOXA?48和blaVIM的细菌作为阳性对照菌株,以携带其他β?内酰胺酶基因细菌作为阴性对照,用于mPCR?CE的灵敏度、特异性评价.收集68株碳青霉烯耐药菌株,利用mPCR?CE方法进行检测,并与PCR扩增后测序结果比较.结果 mPCR?CE检测携带blaKPC、blaNDM和blaVIM细菌最低检测限均为1.5×102 CFU/mL,检测携带blaOXA?48细菌为1.5×103 CFU/mL,并且与携带其他β-内酰胺酶基因的细菌无交叉反应.经mPCR?CE检测,68株临床分离菌株中37株携带blaKPC,8株携带blaNDM,未检测到携带blaOXA?48和blaVIM的菌株,结果与PCR扩增后测序结果完全一致.结论 mPCR?CE可用于临床分离菌株的主要碳青霉烯酶基因检测.
作者：孙宁；于娟；余柏增；陈勇；曹进；黄红娟；王卫萍；张立平；李晓军
来源：临床检验杂志 2021 年 39卷 5期
