目的:通过RNAi方法沉默SP1(转录因子特异性蛋白1)基因研究其对口腔鳞癌细胞KB的生物学功能的影响。方法:构建靶向人SP1基因的干扰序列,采用脂质体介导的转染技术沉默SP1基因的表达,同时采用CCK8法观察其对细胞增殖活性的影响,采用流式细胞仪测定对细胞周期分布的影响,采用Western blotting技术检测细胞凋亡相关蛋白的变化。结果:SP1沉默后能够有效抑制口腔鳞癌细胞KB的增殖活力,24、48、72、96 h抑制率分别为28.58%±3.42%、40.62%±5.78%、65.5%±5.27%、和79.63%±8.23%,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞周期实验显示,下调SP1表达可抑制口腔鳞癌细胞KB阻滞于G1期。 SP1细胞增殖被明显抑制,Western blot检测发现,沉默SP1后Bcl-2表达下调,bax,bik表达上升。结论:SP1可能参与调控口腔鳞癌细胞KB的增殖凋亡,通过促进早期的凋亡以及G1期细胞周期阻滞而发挥抗口腔肿瘤增殖的能力,为以后临床开展SP1为靶点的口腔鳞癌基因治疗提供新的研究思路。
作者:王莹;张卫平;刘梁
来源:临床口腔医学杂志 2015 年 12期