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目的 检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱导肺泡巨噬细胞(AM)的细胞因子表达谱.方法 RT-PCR扩增HMGB1 cDNA,插入pGEX4T-1原核表达载体并转大肠杆菌,IPTG诱导HMGB1表达,Ni2+-NTA和多粘菌素B亲和层析柱分离纯化.应用LiquiChip液相蛋白芯片检测HMGB1(20 ng/ml)诱导AM细胞因子表达谱的变化.结果 成功表达纯化的重组HMGB1可诱导AM肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、MIP-2、单核细胞趋化蛋白-l(MCP-1)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及γ-干扰素(IFN)-γ的表达显著增加(P<0.01).结论 HMGB1可诱导AM释放多种炎性细胞因子.

作者:丁宁;肖慧;许立新;佘守章

来源:临床麻醉学杂志 2010 年 26卷 9期

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作者:
丁宁;肖慧;许立新;佘守章
来源:
临床麻醉学杂志 2010 年 26卷 9期
标签:
高迁移率族蛋白B1 肺泡巨噬细胞 细胞因子
目的 检测高迁移率族蛋白B1(HMGB1)诱导肺泡巨噬细胞(AM)的细胞因子表达谱.方法 RT-PCR扩增HMGB1 cDNA,插入pGEX4T-1原核表达载体并转大肠杆菌,IPTG诱导HMGB1表达,Ni2+-NTA和多粘菌素B亲和层析柱分离纯化.应用LiquiChip液相蛋白芯片检测HMGB1(20 ng/ml)诱导AM细胞因子表达谱的变化.结果 成功表达纯化的重组HMGB1可诱导AM肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)、MIP-2、单核细胞趋化蛋白-l(MCP-1)、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)及γ-干扰素(IFN)-γ的表达显著增加(P<0.01).结论 HMGB1可诱导AM释放多种炎性细胞因子.