目的 研究内质网应激在高糖培养加重神经细胞缺氧-复氧损伤中的作用.方法 在含10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中培养小鼠神经瘤母细胞N2a,按照接种密度每毫升105个将细胞接种于培养板中.采用随机数字分组法将细胞分为四组:正常糖对照组(NC组)、正常糖缺氧-复氧组(NH组)、高糖对照组(HC组)、高糖缺氧-复氧组(HH组).待细胞贴壁后,将DMEM/F12培养基更换为高糖培养基,孵育48 h,造高糖孵育模型.在缺氧小室中缺氧3h后,再转入正常氧孵育箱中复氧2h,造缺氧-复氧损伤模型.NC组未作处理;NH组行缺氧-复氧处理;HC组行高糖孵育处理;HH组先行高糖孵育48 h后,再作缺氧-复氧处理.采用CCK-8法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测细胞GRP78、CHOP蛋白含量.结果 与NC组和HC组比较,NH组和HH组细胞活力明显减弱,~凋亡率明显升高,GRP78、CHOP蛋白含量明显增多(P<0.01);与NH组比较,HH组细胞活力明显减弱,凋亡率明显升高,GRP78、CHOP蛋白含量明显增多(P<0.05).结论 高糖培养加重神经细胞缺氧-复氧损伤,可能与内质网应激标志性蛋白GRP78蛋白含量增多和促凋亡转录因子CHOP介导的细胞凋亡相关.
作者:林慕雅;陈立建;凌军;耿兴强;谢秀秀;都建
来源:临床麻醉学杂志 2018 年 34卷 6期