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目的 探讨α硫辛酸(ALA)保护成纤维细胞避免氧化损伤的作用机制.方法 将成纤维细胞经过ALA(200 μmol/L)预处理2h后,再用H2O2(50 μmol/L)孵育12h.应用噻唑蓝(MTT)法观察细胞存活率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Caspase-3活性,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡率,荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定miR-29b表达,Western blot法检测Bcl-2和Bax蛋白表达.结果 ALA显著逆转H2O2诱导的成纤维细胞活性下降、细胞凋亡增加和Caspase-3活性上升(P<0.05),同时显著下调H2 O2处理细胞的miR-29b表达水平.miR-29b mimic转染细胞可逆转ALA对H2 O2诱导的成纤维细胞的保护作用,引起细胞活性下降、凋亡增加和Bcl-2蛋白表达上调(P<0.05).结论 ALA通过抑制miR-29b表达保护成纤维细胞避免氧化损伤.

作者:吴军;汤慧芹;刘群;干定云;谢菁

来源:临床内科杂志 2016 年 33卷 9期

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作者:
吴军;汤慧芹;刘群;干定云;谢菁
来源:
临床内科杂志 2016 年 33卷 9期
标签:
α硫辛酸 糖尿病足 氧化应激 细胞凋亡 miR-29b Alpha-lipoic acid Diabetic foot Oxidative stress Fibroblasts miR-29b
目的 探讨α硫辛酸(ALA)保护成纤维细胞避免氧化损伤的作用机制.方法 将成纤维细胞经过ALA(200 μmol/L)预处理2h后,再用H2O2(50 μmol/L)孵育12h.应用噻唑蓝(MTT)法观察细胞存活率,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测Caspase-3活性,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡率,荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定miR-29b表达,Western blot法检测Bcl-2和Bax蛋白表达.结果 ALA显著逆转H2O2诱导的成纤维细胞活性下降、细胞凋亡增加和Caspase-3活性上升(P<0.05),同时显著下调H2 O2处理细胞的miR-29b表达水平.miR-29b mimic转染细胞可逆转ALA对H2 O2诱导的成纤维细胞的保护作用,引起细胞活性下降、凋亡增加和Bcl-2蛋白表达上调(P<0.05).结论 ALA通过抑制miR-29b表达保护成纤维细胞避免氧化损伤.