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目的:探讨bcl-2不同靶点的反义寡核苷酸(ASODN)对白血病细胞株K562细胞凋亡的影响.方法:用RNA二级结构预测程序预测bcl-2 mRNA的二级结构;免疫荧光标记观察细胞bcl-2蛋白水平;细胞记数观察细胞的生存情况;用流式细胞仪观察细胞凋亡.结果:在5个初选的反义序列中,靶向bcl-2 mRNA蛋白编码区和翻译起始区的ASODN能明显地下调bcl-2蛋白的表达,并且两个不同靶点的ASODN能有效地抑制K562细胞的生长活性、促进细胞凋亡;靶向bcl-2 mRNA蛋白编码区的ASODN降低细胞bcl-2蛋白、促进细胞凋亡的作用较靶向翻译起始区的ASODN强.随机的无义寡核苷酸对K562细胞的生长活性、bcl-2蛋白水平及细胞凋亡率均无影响.结论:分别在bcl-2 mRNA翻译起始区和蛋白编码区发现了两个有效的反义作用靶点,针对这两个靶点的ASODN能特异性促进K562细胞的凋亡.

作者:雷小勇;张洹;何冬梅

来源:临床血液学杂志 2002 年 15卷 6期

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作者:
雷小勇;张洹;何冬梅
来源:
临床血液学杂志 2002 年 15卷 6期
标签:
Bcl-2 反义寡核苷酸 K562细胞 细胞凋亡
目的:探讨bcl-2不同靶点的反义寡核苷酸(ASODN)对白血病细胞株K562细胞凋亡的影响.方法:用RNA二级结构预测程序预测bcl-2 mRNA的二级结构;免疫荧光标记观察细胞bcl-2蛋白水平;细胞记数观察细胞的生存情况;用流式细胞仪观察细胞凋亡.结果:在5个初选的反义序列中,靶向bcl-2 mRNA蛋白编码区和翻译起始区的ASODN能明显地下调bcl-2蛋白的表达,并且两个不同靶点的ASODN能有效地抑制K562细胞的生长活性、促进细胞凋亡;靶向bcl-2 mRNA蛋白编码区的ASODN降低细胞bcl-2蛋白、促进细胞凋亡的作用较靶向翻译起始区的ASODN强.随机的无义寡核苷酸对K562细胞的生长活性、bcl-2蛋白水平及细胞凋亡率均无影响.结论:分别在bcl-2 mRNA翻译起始区和蛋白编码区发现了两个有效的反义作用靶点,针对这两个靶点的ASODN能特异性促进K562细胞的凋亡.