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目的 探讨过氧化氢/血清饥饿(H2O2/SD)法建立脂肪组织来源干细胞(ASCs)凋亡模型的可行性.方法 酶消化法及贴壁法从小型猪腹股沟脂肪组织中分离、培养ASCs,流式细胞仪检测ASCs表面抗原CD29、CD31、CD34、CD44、CD45、CD90、CD105、HLA-DR的表达.采用不同浓度H2O2(100 μM、200μM、400μM、600 μM、800 μM)联合SD作用于ASCs 6 h,Annexin V-FITC/PI、罗丹明123检测各组细胞凋亡率及线粒体内跨膜电位(△Ψm)的变化.结果 第4代ASCs表面抗原CD29、CD44、CD90、CD105表达呈阳性,CD31、CD34、CD45、HLA-DR表达呈阴性.与对照组比较,不同浓度的H2O2/SD干预6h均可引起ASCs不同程度的凋亡,而细胞凋亡率最明显的是200 μM组(P<0.05),该浓度组也引起△Ψm明显下降(P<0.01).结论 过氧化氢联合血清饥饿是一种简单有效诱导干细胞凋亡的方法.

作者:裴志勇;赵玉生;高伟;尹巧香

来源:中国临床保健杂志 2012 年 15卷 3期

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作者:
裴志勇;赵玉生;高伟;尹巧香
来源:
中国临床保健杂志 2012 年 15卷 3期
标签:
干细胞移植 脂肪组织 过氧化氢 培养基,无血清 模型,动物
目的 探讨过氧化氢/血清饥饿(H2O2/SD)法建立脂肪组织来源干细胞(ASCs)凋亡模型的可行性.方法 酶消化法及贴壁法从小型猪腹股沟脂肪组织中分离、培养ASCs,流式细胞仪检测ASCs表面抗原CD29、CD31、CD34、CD44、CD45、CD90、CD105、HLA-DR的表达.采用不同浓度H2O2(100 μM、200μM、400μM、600 μM、800 μM)联合SD作用于ASCs 6 h,Annexin V-FITC/PI、罗丹明123检测各组细胞凋亡率及线粒体内跨膜电位(△Ψm)的变化.结果 第4代ASCs表面抗原CD29、CD44、CD90、CD105表达呈阳性,CD31、CD34、CD45、HLA-DR表达呈阴性.与对照组比较,不同浓度的H2O2/SD干预6h均可引起ASCs不同程度的凋亡,而细胞凋亡率最明显的是200 μM组(P<0.05),该浓度组也引起△Ψm明显下降(P<0.01).结论 过氧化氢联合血清饥饿是一种简单有效诱导干细胞凋亡的方法.