目的:探讨抑制miR?23a对EGFR T790M突变非小细胞肺癌H1975细胞吉非替尼耐药性的影响及其可能机制。方法选取吉非替尼耐药的对数生长期H1975细胞为研究样本,合成miR?23a抑制物( miR?23a inhibitor),应用脂质体转染H1975细胞以抑制其miR?23a表达(抑制组),同时设未经转染处理的非转染组和转染无关序列的阴性对照组,实时荧光定量PCR( qRT?PCR)验证转染效果;采用CCK?8法检测转染24、48、72及96 h后各组的增殖情况,同时于转染48 h后用吉非替尼(0?03~300μmol/L)处理各组细胞以评价对吉非替尼的药物敏感性变化情况;分别用流式细胞术检测各组的凋亡率( FITC?Annexin V/PI双染)和细胞周期(PI单染)情况,免疫印迹法检测各组多药耐药相关蛋白1(MRP1)、肺耐药相关蛋白(LRP)及谷胱甘肽转移酶π( GST?π)的表达变化。结果抑制组在转染24~96 h出现miR?23a水平的持续下降,其miR?23a水平均低于其余两组,转染96 h后的miR?23a水平分别为非转染组的(32?06±4?68)%和阴性对照组的(31?77±3?18)%,且吉非替尼对抑制组的半数抑制浓度(IC50)为(2?82±0?46)μmol/L,均低于其余两组,以上差异均有统计学意义(P<0?05);与其余两组相比,抑制组转染后增殖抑制率、凋亡率及G0/G1期比
作者:王季颖;蔡勇;白冲
来源:临床肿瘤学杂志 2015 年 8期