目的 探讨miRNA-25在非小细胞肺癌(NSCLC)吉非替尼耐药细胞中的表达及其作用机制.方法 采用RT-PCR法检测miRNA-25在NSCLC吉非替尼耐药细胞PC9/G及亲本细胞PC9中的表达;采用体外转染法将miRNA-25模拟物或抑制物分别转染PC9和PC9/G细胞,采用CCK8实验检测转染前后细胞对吉非替尼敏感性的变化;并用Westem blot检测转染前后细胞中Bim的表达变化.采用双荧光素酶报告基因验证miRNA-25是否作用于Bim基因的3'-UTR区预测靶位.结果 miRNA-25在PC9/G细胞中的表达水平是PC9细胞的(7.15±1.26)倍(P<0.01).PC9细胞转染miRNA-25模拟物后,吉非替尼对PC9细胞增殖的抑制率较转染前明显下降(P<0.01),细胞内Bim表达水平较转染前明显下降(P<0.05).PC9/G细胞在转染miRNA-25抑制物后,吉非替尼对PC9/G细胞增殖的抑制率与转染前比较明显增加(P<0.01),细胞内Bim表达水平较转染前明显增高(P<0.05).经双荧光素酶报告基因验证Bim是miRNA-25的靶基因.结论 miRNA-25在NSCLC耐药细胞PC9/G中异常高表达,下调其表达可部分逆转细胞耐药性,miRNA-25可能通过作用于Bim参与NSCLC细胞吉非替尼耐药的发生和发展.
作者:周建英;刘震天;陈颖兰
来源:实用癌症杂志 2016 年 31卷 10期