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目的:探讨RNA干扰斑点型POZ蛋白(SPOP)基因表达对人膀胱癌T24细胞生物学行为的影响。方法采用阳离子脂质体转染试剂Lipofectamine 2000将靶向沉默SPOP基因的小干扰RNA( siRNA)序列siRNA1和siRNA2分别转染至T24细胞株( siRNA1组和siRNA2组),设转染随机序列的T24细胞为对照组,采用实时定量逆转录聚合酶链反应( qRT?PCR)和Western blotting分别检测各组转染48 h后的SPOP mRNA及蛋白水平,细胞增殖活性检测试剂盒( CCK?8)检测细胞体外增殖活力,Transwell迁移试验及划痕试验观察各组的迁移能力。结果对照组、siRNA1组和siRNA2组的SPOP mRNA相对表达量为1?012±0?025、0?281±0?023和0?274±0?053,蛋白相对表达量为0?712±0?153、0?358±0?073和0?317±0?084,siR?NA1组和siRNA2组的SPOP mRNA和蛋白水平均低于对照组( P<0?05),siRNA1组和siRNA2组SPOP mRNA和蛋白水平的差异无统计学差异( P>0?05);与对照组比较, siRNA1组和 siRNA2组的增殖活性升高,差异有统计学意义( P<0?05),且siRNA1组和siRNA2组的增殖率随转染时间的延长而增加( P<0?05);Transwell迁移试验结果显示siRNA1组和siRNA2组的穿膜细胞数分别为(128?6±9?3)个和(134?5±8?6)个,均高于对照组的(92?5±8?4)

作者:马俊红;李胜文

来源:临床肿瘤学杂志 2016 年 21卷 3期

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作者:
马俊红;李胜文
来源:
临床肿瘤学杂志 2016 年 21卷 3期
标签:
膀胱癌 斑点型POZ蛋白 RNA干扰技术 细胞增殖 细胞迁移 Bladder cancer Speckle-type POZ protein RNA interference Cell proliferation Cell migration
目的:探讨RNA干扰斑点型POZ蛋白(SPOP)基因表达对人膀胱癌T24细胞生物学行为的影响。方法采用阳离子脂质体转染试剂Lipofectamine 2000将靶向沉默SPOP基因的小干扰RNA( siRNA)序列siRNA1和siRNA2分别转染至T24细胞株( siRNA1组和siRNA2组),设转染随机序列的T24细胞为对照组,采用实时定量逆转录聚合酶链反应( qRT?PCR)和Western blotting分别检测各组转染48 h后的SPOP mRNA及蛋白水平,细胞增殖活性检测试剂盒( CCK?8)检测细胞体外增殖活力,Transwell迁移试验及划痕试验观察各组的迁移能力。结果对照组、siRNA1组和siRNA2组的SPOP mRNA相对表达量为1?012±0?025、0?281±0?023和0?274±0?053,蛋白相对表达量为0?712±0?153、0?358±0?073和0?317±0?084,siR?NA1组和siRNA2组的SPOP mRNA和蛋白水平均低于对照组( P<0?05),siRNA1组和siRNA2组SPOP mRNA和蛋白水平的差异无统计学差异( P>0?05);与对照组比较, siRNA1组和 siRNA2组的增殖活性升高,差异有统计学意义( P<0?05),且siRNA1组和siRNA2组的增殖率随转染时间的延长而增加( P<0?05);Transwell迁移试验结果显示siRNA1组和siRNA2组的穿膜细胞数分别为(128?6±9?3)个和(134?5±8?6)个,均高于对照组的(92?5±8?4)