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目的:探索中药单体20( S)-人参皂苷Rg3( Rg3)对肝癌细胞自噬介导的索拉非尼药物敏感性的影响。方法以人肝癌细胞株Hep3B为观察对象,分别接受Rg3、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)、索拉非尼、Rg3+索拉非尼和3-MA+索拉非尼处理,采用MTT法检测Hep3B细胞对Rg3、索拉非尼及3-MA的敏感性,CCK-8法检测Rg3、3-MA分别联合索拉非尼后对Hep3B细胞的增殖抑制作用,q值判断联合用药效果;LC3 Conversion实验及LC3 Turnover实验检测Rg3和索拉非尼对Hep3B细胞自噬的影响,Western blotting检测Rg3和索拉非尼对自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ、p62水平的影响。结果 MTT检测显示,3种药物对Hep3B细胞的增殖抑制作用呈剂量和时间依赖性。 CCK-8检测显示,低、中浓度(0.5、1μg/ml)索拉非尼联合Rg3或3-MA对Hep3B细胞抑制作用均增强( P均<0.01),表现为协同作用;高浓度(2μg/ml)索拉非尼联合Rg3亦呈抑制增强作用( P<0.05),但联合3-MA的差异无统计学意义( P>0.05),高浓度索拉非尼与两药联合后均表现为相加作用。 LC3 Conversion实验显示,随着药物作用时间的延长,Rg3及索拉非尼均使LC3-Ⅱ蛋白水平逐渐升高;LC3 Turnover实验显示,索拉非尼联合溶酶体抑制剂氯喹( CQ)后,LC3-Ⅱ蛋白

作者:郑侠;华海清;杨爱珍;秦叔逵

来源:临床肿瘤学杂志 2016 年 21卷 4期

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作者:
郑侠;华海清;杨爱珍;秦叔逵
来源:
临床肿瘤学杂志 2016 年 21卷 4期
标签:
肝细胞癌 20(S)-人参皂苷Rg3 索拉非尼 自噬 药物敏感性 Hepatocellular carcinoma 20(s)-ginseoside Rg3 Sorafenib Autophagy Drug sensitivity
目的:探索中药单体20( S)-人参皂苷Rg3( Rg3)对肝癌细胞自噬介导的索拉非尼药物敏感性的影响。方法以人肝癌细胞株Hep3B为观察对象,分别接受Rg3、自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)、索拉非尼、Rg3+索拉非尼和3-MA+索拉非尼处理,采用MTT法检测Hep3B细胞对Rg3、索拉非尼及3-MA的敏感性,CCK-8法检测Rg3、3-MA分别联合索拉非尼后对Hep3B细胞的增殖抑制作用,q值判断联合用药效果;LC3 Conversion实验及LC3 Turnover实验检测Rg3和索拉非尼对Hep3B细胞自噬的影响,Western blotting检测Rg3和索拉非尼对自噬相关蛋白Beclin1、LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ、p62水平的影响。结果 MTT检测显示,3种药物对Hep3B细胞的增殖抑制作用呈剂量和时间依赖性。 CCK-8检测显示,低、中浓度(0.5、1μg/ml)索拉非尼联合Rg3或3-MA对Hep3B细胞抑制作用均增强( P均<0.01),表现为协同作用;高浓度(2μg/ml)索拉非尼联合Rg3亦呈抑制增强作用( P<0.05),但联合3-MA的差异无统计学意义( P>0.05),高浓度索拉非尼与两药联合后均表现为相加作用。 LC3 Conversion实验显示,随着药物作用时间的延长,Rg3及索拉非尼均使LC3-Ⅱ蛋白水平逐渐升高;LC3 Turnover实验显示,索拉非尼联合溶酶体抑制剂氯喹( CQ)后,LC3-Ⅱ蛋白