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目的 探讨微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)对胃癌HGC-27细胞侵袭迁移及肌RAS癌基因同源基因(MRAS)表达的影响.方法 将冻存的胃癌细胞株HGC-27复苏并常规培养至对数生长期,将miR-148a-3p模拟物及其阴性对照(miR-NC)分别转染HGC-27细胞(miR-148a-3p转染组和miR-NC组),以未行转染的HGC-27细胞为空白对照(未转染组),采用实时定量PCR(QPCR)检测各组转染48 h后的miR-148a-3p水平,划痕实验和Transwell侵袭实验分别比较各组HGC-27细胞转染48 h后的迁移相对距离和穿膜细胞数目以评价迁移和侵袭情况,QPCR和Western blotting分别检测各组转染48 h后MRAS的mRNA和蛋白水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-148a-3p与MRAS之间的靶向调节作用.结果 QPCR检测显示转染48 h后miR-148a-3p转染组的miR-148a-3p水平为2.612±0.213,高于未转染组的0.954±0.098和miR-NC组的0.983±0.196,差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验结果显示,miR-148a-3p转染组的相对迁移距离为0.615±0.019,低于未转染组的1.021±0.019和miR-NC组的0.948±0.022,Transwell侵袭实验显示miR-148a-3p转染组的穿膜细胞数目为(83±17)个,少于未转染组的(124±17)个和miR-NC组的(136±26)个,差异有统计学意义(P<0.05).QPCR和Westernblotting结果显示,miR-148a-3

作者:王建国;孙沛达;刘海燕;陈林

来源:临床肿瘤学杂志 2017 年 22卷 10期

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王建国;孙沛达;刘海燕;陈林
来源:
临床肿瘤学杂志 2017 年 22卷 10期
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胃癌 侵袭和转移 微小RNA-148a-3p 肌RAS癌基因同源基因 Gastric cancer Invasion and metastasis MicroRNA-148a-3p Muscle RAS oncogene homolog
目的 探讨微小RNA-148a-3p(miR-148a-3p)对胃癌HGC-27细胞侵袭迁移及肌RAS癌基因同源基因(MRAS)表达的影响.方法 将冻存的胃癌细胞株HGC-27复苏并常规培养至对数生长期,将miR-148a-3p模拟物及其阴性对照(miR-NC)分别转染HGC-27细胞(miR-148a-3p转染组和miR-NC组),以未行转染的HGC-27细胞为空白对照(未转染组),采用实时定量PCR(QPCR)检测各组转染48 h后的miR-148a-3p水平,划痕实验和Transwell侵袭实验分别比较各组HGC-27细胞转染48 h后的迁移相对距离和穿膜细胞数目以评价迁移和侵袭情况,QPCR和Western blotting分别检测各组转染48 h后MRAS的mRNA和蛋白水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-148a-3p与MRAS之间的靶向调节作用.结果 QPCR检测显示转染48 h后miR-148a-3p转染组的miR-148a-3p水平为2.612±0.213,高于未转染组的0.954±0.098和miR-NC组的0.983±0.196,差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验结果显示,miR-148a-3p转染组的相对迁移距离为0.615±0.019,低于未转染组的1.021±0.019和miR-NC组的0.948±0.022,Transwell侵袭实验显示miR-148a-3p转染组的穿膜细胞数目为(83±17)个,少于未转染组的(124±17)个和miR-NC组的(136±26)个,差异有统计学意义(P<0.05).QPCR和Westernblotting结果显示,miR-148a-3