目的 探讨微小RNA-378a(miR-378a)对皮肤鳞癌(CSCC)细胞侵袭、迁移和CD226表达的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(QPCR)检测CSCC细胞A431和人角质形成细胞HaCaT的miR-378a水平;将体外常规培养的A431细胞进行转染,根据转染物不同分为增强转染组(转染miR-378a mimics)、抑制转染组(转染miR-378a inhibitor)和空白转染组(无转染).采用QPCR、活细胞计数( CCK)-8、Annexin V-FITC/PI 双染流式细胞术、 Transwell 细胞迁移和侵袭实验以及Western blotting检测miR-378a水平、增殖活力、凋亡率、穿膜细胞数和CD226水平;构建荧光素酶报告质粒psiCHECK-2,并采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-378a与CD226基因的靶向关系.结果 与HaCaT细胞(1. 089±0. 197)相比,A431细胞的miR-378a水平升高至4. 435±0. 807(P<0. 05).与空白转染组的1. 031± 0. 173相比,增强转染组的miR-378a水平升高至11. 846±2. 179,而抑制转染组则降低至0. 162±0. 040;与空白转染组相比,增强转染组转染48、72 h后的增殖活力升高,而抑制转染组则降低;与空白转染组的(7. 464±1. 281)
作者:王新月;杨洲;李灵
来源:临床肿瘤学杂志 2020 年 25卷 1期