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目的:探讨慢病毒介导的RNA干扰叉头框C2(FOXC2)表达对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制.方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和免疫印迹法检测人正常永生化上皮Hecate细胞和皮肤鳞状细胞癌A431细胞中FOXC2 mRNA和蛋白的表达水平.将体外培养的A431细胞分为对照组(正常培养)、NC-shRNA组(LV-NC-shRNA慢病毒感染)和FOXC2-shRNA组(LV-FOXC2-shRNA慢病毒感染),采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹法检测细胞中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化(p)-AKT、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达水平.结果:与Hecate细胞比较,A431细胞中FOXC2 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05).与对照组比较,NC-shRNA组细胞中FOXC2 mRNA表达水平、细胞存活率、侵袭数目、克隆形成率、细胞凋亡率和FOXC2、p-AKT、CyclinD1、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组或NC-shRNA组比较,FOXC2-shRNA组细胞中FOXC2 mRNA表达水平、细胞存活率、侵袭数目、克隆形成率和FOXC2、p-AKT、CyclinD1、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平均明显降低,而细胞凋亡率

作者:陈瑛毅

来源:现代肿瘤医学 2021 年 29卷 8期

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作者:
陈瑛毅
来源:
现代肿瘤医学 2021 年 29卷 8期
标签:
皮肤鳞状细胞癌 叉头框C2 细胞增殖 侵袭 凋亡 蛋白激酶B信号通路
目的:探讨慢病毒介导的RNA干扰叉头框C2(FOXC2)表达对皮肤鳞状细胞癌A431细胞增殖、侵袭和凋亡的影响及其机制.方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)和免疫印迹法检测人正常永生化上皮Hecate细胞和皮肤鳞状细胞癌A431细胞中FOXC2 mRNA和蛋白的表达水平.将体外培养的A431细胞分为对照组(正常培养)、NC-shRNA组(LV-NC-shRNA慢病毒感染)和FOXC2-shRNA组(LV-FOXC2-shRNA慢病毒感染),采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,免疫印迹法检测细胞中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化(p)-AKT、细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)蛋白表达水平.结果:与Hecate细胞比较,A431细胞中FOXC2 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05).与对照组比较,NC-shRNA组细胞中FOXC2 mRNA表达水平、细胞存活率、侵袭数目、克隆形成率、细胞凋亡率和FOXC2、p-AKT、CyclinD1、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05);与对照组或NC-shRNA组比较,FOXC2-shRNA组细胞中FOXC2 mRNA表达水平、细胞存活率、侵袭数目、克隆形成率和FOXC2、p-AKT、CyclinD1、MMP-9、Bcl-2蛋白表达水平均明显降低,而细胞凋亡率