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[背景]砷可导致细胞损伤,引起细胞自噬和凋亡,而细胞自噬与凋亡之间目前没有明确界限,二者关系目前尚不明确.[目的]探讨亚砷酸钠致人胚肺成纤维细胞(HELF)损伤中细胞自噬与凋亡的关系.[方法]HELF细胞株培养3d后传代,随机分为对照组、亚砷酸钠处理组(亚砷酸钠浓度分别为5、10、20 μmol/L)、自噬抑制组(20 μmol/L NaAsO2+5 mmol/L 3-甲基腺嘌呤)、凋亡抑制组(20 μmol/L NaAsO2+20 J.mol/L Caspase抑制剂z-VAD-FMK),染毒48h后,MTT实验检测细胞存活率,倒置显微镜观察细胞形态学改变.提取细胞上清液、蛋白,ELISA法测定上清液中白介素(IL)-1β、IL-6、干扰素受体(IFN)-α含量.Western blot检测自噬相关蛋白p62和LC3的表达水平.Caspase试剂盒检测凋亡相关蛋白caspase3/7.[结果]各组细胞存活率在染毒12、24、48h后均低于对照组(P<0.05).随着染毒浓度增加细胞形态学改变,由紧密的梭形逐渐变为松散的圆形.10、20 μmol/L砷染毒组HELF细胞上清液中IL-1β表达量升高(P<0.05);各砷染毒组细胞培养上清液中促炎因子IL-6、IFN-α表达量高于对照组(P<0.05);与20 μmol/L亚砷酸钠染毒组相比,自噬抑制组呈现促炎因子表达量升高的趋势,凋亡抑制组呈现降低的趋势.与对照组相比,砷染毒组细胞中LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达量呈

作者:王馨悦;王素华;王丽;赵宇航;高艳荣

来源:环境与职业医学 2019 年 36卷 9期

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作者:
王馨悦;王素华;王丽;赵宇航;高艳荣
来源:
环境与职业医学 2019 年 36卷 9期
标签:
砷 人胚肺成纤维细胞 炎性因子 细胞自噬 细胞凋亡
[背景]砷可导致细胞损伤,引起细胞自噬和凋亡,而细胞自噬与凋亡之间目前没有明确界限,二者关系目前尚不明确.[目的]探讨亚砷酸钠致人胚肺成纤维细胞(HELF)损伤中细胞自噬与凋亡的关系.[方法]HELF细胞株培养3d后传代,随机分为对照组、亚砷酸钠处理组(亚砷酸钠浓度分别为5、10、20 μmol/L)、自噬抑制组(20 μmol/L NaAsO2+5 mmol/L 3-甲基腺嘌呤)、凋亡抑制组(20 μmol/L NaAsO2+20 J.mol/L Caspase抑制剂z-VAD-FMK),染毒48h后,MTT实验检测细胞存活率,倒置显微镜观察细胞形态学改变.提取细胞上清液、蛋白,ELISA法测定上清液中白介素(IL)-1β、IL-6、干扰素受体(IFN)-α含量.Western blot检测自噬相关蛋白p62和LC3的表达水平.Caspase试剂盒检测凋亡相关蛋白caspase3/7.[结果]各组细胞存活率在染毒12、24、48h后均低于对照组(P<0.05).随着染毒浓度增加细胞形态学改变,由紧密的梭形逐渐变为松散的圆形.10、20 μmol/L砷染毒组HELF细胞上清液中IL-1β表达量升高(P<0.05);各砷染毒组细胞培养上清液中促炎因子IL-6、IFN-α表达量高于对照组(P<0.05);与20 μmol/L亚砷酸钠染毒组相比,自噬抑制组呈现促炎因子表达量升高的趋势,凋亡抑制组呈现降低的趋势.与对照组相比,砷染毒组细胞中LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达量呈