目的克隆肿瘤抗原MAGE-3基因3'端657 bp片段,对其编码的蛋白羧基端97～314aa进行原核表达.方法从含人MAGE-3基因全长cDNA的pUC19/MAGE-3质粒中经聚合酶链式反应(PCR)扩增3'端657 bp片段,并克隆入pGEX-4T-1载体,构建重组原核表达质粒pGEX/MAGE-3,对含有该质粒的大肠杆菌DH5α进行诱导表达.结果从pUC19/MAGE-3重组质粒中扩增获得一条约660 bp的条带,测序结果表明与GenBank公布的MAGE-3序列一致,成功地构建了pGEX/MAGE-3原核表达质粒,含有该质粒的大肠杆菌DH5α经异丙基-β-D-半乳糖苷(Isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导后表达Mr为54 000 的谷胱甘肽巯基转移酶 (Glutathione S-transferse,GST)融合蛋白.表达的融合蛋白约占菌体蛋白总量的28
作者：马加海；隋延仿；叶菁；黄亚渝；陈广生；张秀敏
来源：免疫学杂志 2004 年 20卷 1期
